[發(fā)明專利]一種鹽節(jié)木擴(kuò)繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610043912.6
• 申請日: 2016-01-22
• 公開（公告）號: CN105557526B
• 公開（公告）日: 2018-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉維仲;陳惠;遆衛(wèi)國
• 申請（專利權(quán)）人: 山西師范大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11245
• 代理人: 關(guān)暢,白艷

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種鹽節(jié)木擴(kuò)繁方法。

背景技術(shù)

鹽節(jié)木屬于藜科鹽節(jié)木屬的一種鹽生植物,分布在從非洲北部到歐洲地中海到亞洲西部地區(qū)的鹽堿地上(Qu等2008)。我國主要分布在新疆準(zhǔn)噶爾盆地、塔里木盆地和河西走廊等地,是鹽生荒漠地中生長的多年生半灌木優(yōu)勢植物種,對鹽生環(huán)境具有極其廣泛的適應(yīng)性(高瑞如等2007,2009),鹽節(jié)木種子中含有一定量的油,具有食用價值；植株體內(nèi)還含堿,是用于制作堿的原料；此外,粗蛋白含量也較高,可作為荒漠地區(qū)動物的秋季飼料(孔令紹等,1995)。其莖葉肉質(zhì)化縮短成枝,因含葉綠素能進(jìn)行光合作用,也叫同化枝,細(xì)胞液泡中水分含量較高,野生鹽節(jié)木因根深入地下很深,很難移栽成活,而且種子萌發(fā)率低,生長周期長。

目前,有關(guān)鹽節(jié)木的研究前人已在種子的萌發(fā)與幼苗生長,群落的結(jié)構(gòu)特征,生物學(xué)特性,類黃酮、咖啡酸酯以及香豆素等化學(xué)成分的提取和資源的開發(fā)等方面有過一些報道(高瑞如等,2007；2009；Qu等2008；房娟娟等,2015),關(guān)于組織培養(yǎng)快速繁殖方面的研究,尚未見報道。鹽節(jié)木因種子小,存在萌發(fā)所需時間長、萌發(fā)具有不同步性以及播種繁殖幼苗管理困難等缺點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個目的是提供一種鹽節(jié)木擴(kuò)繁方法。

本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟：

1)將鹽節(jié)木同化枝外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到誘導(dǎo)培養(yǎng)后腋芽叢生苗；

2)將源于所述誘導(dǎo)培養(yǎng)后腋芽叢生苗的同化枝在所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中繼代增殖培養(yǎng)，得到繼代增殖培養(yǎng)后腋芽叢生苗；

3)將源于所述繼代增殖培養(yǎng)后腋芽叢生苗的同化枝在生根培養(yǎng)基中生根培養(yǎng)，得到生根培養(yǎng)后苗；

4)將所述生根培養(yǎng)后苗依次煉苗、移栽，實現(xiàn)鹽節(jié)木擴(kuò)繁。

上述方法中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為將含有6-BA的添加物添加到MS液體培養(yǎng)基得到的培養(yǎng)基，其中，所述6-BA的濃度為0.05-1mg·L^-1；

或所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為將含有NAA和6-BA的添加物添加到MS培養(yǎng)基得到的培養(yǎng)基，其中，所述NAA的濃度為0.1-1mg·L^-1所述6-BA的濃度為0.05-1mg·L^-1。

所述生根培養(yǎng)基為將含有IBA的添加物添加到MS液體培養(yǎng)基得到的培養(yǎng)基，其中，所述IBA的濃度為0.05-0.2mg·L^-1。

上述方法中，

所述含有6-BA的添加物由蔗糖、6-BA和凝固劑組成；

所述含有NAA和6-BA的添加物由蔗糖、NAA、6-BA和凝固劑組成；

所述含有IBA的添加物由IBA和凝固劑組成；

所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為如下A)或B)：

A)所示的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為將蔗糖、6-BA、凝固劑和MS液體培養(yǎng)基混勻，得到的培養(yǎng)基，其中，所述蔗糖和所述6-BA的濃度分別為30g·L^-1和1mg·L^-1；

B)所示的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為將蔗糖、NAA、6-BA、凝固劑和MS液體培養(yǎng)基混勻，得到的培養(yǎng)基，其中，所述蔗糖、所述NAA和所述6-BA的濃度分別為30g·L^-1、1mg·L^-1和0.05mg·L^-1；

所述生根培養(yǎng)基將IBA、凝固劑和MS液體培養(yǎng)基混勻，得到的培養(yǎng)基，其中，所述IBA的濃度為0.05mg·L^-1。

上述方法中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的條件為:23-28℃、光照強(qiáng)度120-130μmol·m^-2·s^-1、光照時間12h·d^-1下培養(yǎng)30-45天；

所述繼代增殖培養(yǎng)的條件為：23-28℃、光照強(qiáng)度120-130μmol·m^-2·s^-1、光照時間12h·d^-1下培養(yǎng)30-45天；

所述生根培養(yǎng)的條件為：23-28℃；光照強(qiáng)度120-150μmol·m^-2·s^-1、光照時間12h·d^-1下培養(yǎng)60天。

上述方法中，在步驟1)前還包括如下制備外植體的步驟：將鹽節(jié)木的種子在萌發(fā)培養(yǎng)基中萌發(fā)培養(yǎng)得到幼苗，所述幼苗上的同化枝，即為外植體；