[發明專利]一種引物組及其在擴增SIV/SHIV基因組中的應用與試劑盒有效
| 申請號: | 201610041772.9 | 申請日: | 2016-01-21 |
| 公開(公告)號: | CN105624153B | 公開(公告)日: | 2018-10-12 |
| 發明(設計)人: | 王衛;高峰;秦川;魏強 | 申請(專利權)人: | 中國醫學科學院醫學實驗動物研究所;吉林大學 |
| 主分類號: | C12N15/11 | 分類號: | C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人: | 趙青朵 |
| 地址: | 100021 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 引物 及其 擴增 siv shiv 基因組 中的 應用 試劑盒 | ||
1.一種引物組,其特征在于,包括由SEQ ID NO:1~4所示核苷酸序列組成的4條引物和/或由SEQ ID NO:5~8所示核苷酸序列組成的4條引物。
2.權利要求1所述的引物組在制備擴增SIV/SHIV基因組的試劑中的應用。
3.一種擴增SIV/SHIV基因組的試劑盒,其特征在于,包括權利要求1所述的引物組。
4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,還包括由SEQ ID NO:9所示核苷酸序列組成的逆轉錄引物。
5.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,還包括Superscript III酶和HighFidelity Taq酶。
6.非治療與診斷目的的擴增SIV/SHIV基因組的方法,其特征在于,包括:以待測樣品的cDNA為模板,以權利要求1所述的引物組擴增。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述擴增采用巢式PCR分別擴增SIV/SHIV基因組的5’半長、3’半長。
8.根據權利要求7所述的方法,其特征在于,所述SIV/SHIV基因組的5’半長的擴增包括:
步驟1:以待測樣品的cDNA為模板,以SEQ ID NO:1~2所示核苷酸序列的引物擴增,獲得中間產物;
步驟2:以所述中間產物為模板,以SEQ ID NO:3~4所示核苷酸序列的引物擴增,獲得SIV/SHIV基因組的5’半長。
9.根據權利要求7所述的方法,其特征在于,所述SIV/SHIV基因組的3’半長的擴增包括:
步驟1:以待測樣品的cDNA為模板,以SEQ ID NO:5~6所示核苷酸序列的引物擴增,獲得中間產物;
步驟2:以所述中間產物為模板,以SEQ ID NO:7~8所示核苷酸序列的引物擴增,獲得SIV/SHIV基因組的3’半長。
10.根據權利要求6~9任一項所述的方法,其特征在于,所述待測樣品為血漿、組織、細胞或質粒。
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