[發明專利]一種快速檢測絲狀真菌合成低聚果糖能力的平板顯色方法

有效

• 申請號: 201610040343.X
• 申請日: 2016-01-21
• 公開（公告）號: CN105463062B
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 鐘耀華;張靜;李寧;謝益佳;寧占國;周煥霞
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12Q1/54
• 分類號: C12Q1/54;C12Q1/28;C12Q1/26
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李健康

1.一種快速檢測絲狀真菌合成低聚果糖能力的平板顯色方法，步驟是：

(1)將待測的絲狀真菌新鮮孢子分別用無菌生理鹽水稀釋至1×10⁷～10⁸個/mL，制得絲狀真菌孢子懸液備用；其中所述絲狀真菌是：黑曲霉(Aspergillus niger)、塔賓曲霉(Aspergillus tubingensis)或棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)；同時，將工業用黑曲霉XG530菌株作為本檢測絲狀真菌合成低聚果糖能力平板顯色方法的標準菌株，以相同實驗條件制備孢子懸液備用；

(2)分別取步驟(1)制備的絲狀真菌孢子懸液及標準菌株孢子懸液1μl，點種于察氏固體培養基的平板上，其中各菌株孢子之間點種距離不小于2cm，在30±3℃培養5～10小時；

(3)配制葡萄糖檢測液，直接倒在步驟(2)培養后的長有菌落的平板上，并使其均勻覆蓋平板上的所有培養基表面，然后40±5℃靜置10～20min，觀察菌落周圍形成的紅色暈圈，比較待測菌株與標準菌株形成的紅色暈圈的大小，若紅色暈圈比標準菌株形成的大即可判定該待測菌株合成低聚果糖能力強，若紅色暈圈比標準菌株形成的小即可判定該待測菌株合成低聚果糖能力弱；其中，所述葡萄糖檢測液的配方是：葡萄糖氧化酶(GOD)4～6U/ml，過氧化物酶(POD)0.2～0.4U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，瓊脂粉0.007g/ml。

2.根據權利要求1所述快速檢測絲狀真菌合成低聚果糖能力的平板顯色方法，其特征在于，步驟(1)所述絲狀真菌孢子懸液濃度為1×10⁷個/mL。

3.根據權利要求1所述快速檢測絲狀真菌合成低聚果糖能力的平板顯色方法，其特征在于，步驟(2)所述培養溫度為30℃，培養時間為5小時。

4.根據權利要求1所述快速檢測絲狀真菌合成低聚果糖能力的平板顯色方法，其特征在于，步驟(3)所述葡萄糖檢測液的配方是：葡萄糖氧化酶(GOD)5U/ml，過氧化物酶(POD)0.3U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，瓊脂粉0.007g/ml。