[發(fā)明專(zhuān)利]肺癌特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件的篩選方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610040342.5
• 申請(qǐng)日: 2016-01-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105506062A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許瑞安;李文茂;高燕;吳雅清;蔡雙鳳;崔秀靈
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 華僑大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/66
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/66
• 代理公司: 泉州市文華專(zhuān)利代理有限公司 35205
• 代理人: 戴中生

1.一種肺癌特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件的篩選方法，其特征在于：通過(guò)UCSC數(shù)據(jù)庫(kù)獲取非小 細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞中DKK1基因位點(diǎn)周?chē)?7kb長(zhǎng)區(qū)域的表觀遺傳信息，對(duì)獲得的表觀遺傳信 息進(jìn)行分析預(yù)測(cè)得到12條候選增強(qiáng)子轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件片段，接著將這12條選增強(qiáng)子轉(zhuǎn)錄調(diào)控 元件片段分別插入到DKK1近端啟動(dòng)子上游，成功構(gòu)建熒光素酶重組質(zhì)粒；所得熒光素酶重 組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞、非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞、小細(xì)胞肺癌H446細(xì)胞、 食道癌Eca-109細(xì)胞、正常肝細(xì)胞Changliver和人胚腎細(xì)胞HEK293，并通過(guò)雙熒光素酶報(bào) 告基因檢測(cè)系統(tǒng)檢驗(yàn)相關(guān)候選元件活性，篩選到對(duì)DKK1啟動(dòng)子具有較高的增強(qiáng)表達(dá)作用的 調(diào)控元件即所述肺癌特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肺癌特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件的篩選方法，其特征在于：所述表觀 遺傳信息為DNaseI超敏性、組蛋白修飾與P300結(jié)合位點(diǎn)。