[發(fā)明專利]豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡及其制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201610039823.4
• 申請日: 2016-01-21
• 公開（公告）號: CN105527429A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳俊清;章健;吳冠英;王澤洲;王正財
• 申請（專利權(quán)）人: 成都微瑞生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，包括裝配在外殼內(nèi)的檢測卡本體，其特征在于：所述檢測卡本體包括底板，在底板上從左至右依次粘貼樣品墊、標記墊、硝酸纖維素膜和吸水紙，且樣品墊的右端搭在標記墊的左端上，標記墊的右端搭在硝酸纖維素膜的左端上，吸水紙左端搭在硝酸纖維素膜的右端上，所述標記墊由載體基層和標記物組成，標記物為載體基層上噴涂鑭系熒光檢測微球和鑭系熒光質(zhì)控微球形成的一層膜，所述檢測微球和質(zhì)控微球均為表面帶有羥基或氨基的硅膠微球或聚苯乙烯微球，所述硝酸纖維素膜上包被豬圓環(huán)抗原為檢測線，包被羊抗雞抗體為質(zhì)控線，在外殼上對應(yīng)樣品墊開設(shè)加樣孔，對應(yīng)硝酸纖維素膜上的檢測線和質(zhì)控線開設(shè)視窗孔。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，其特征在于：所述檢測微球為標記有豬圓環(huán)抗原的微球，質(zhì)控微球為標記有雞lgY或兔lgG的質(zhì)控微球。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，其特征在于：所述硝酸纖維素膜上的檢測線和標記墊上采用的豬圓環(huán)抗原均為滅活豬圓環(huán)病毒抗原、豬圓環(huán)疫苗、豬圓環(huán)病毒衣殼蛋白PCV2-Cap或豬圓環(huán)病毒2多肽；所述硝酸纖維素膜上質(zhì)控線采用的羊抗雞抗體為羊抗雞lgY的lgG或者羊抗兔lgG。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，其特征在于：所述標記在生物原料上的鑭系熒光微球的鑭系熒光是指鑭系元素Eu、Sm或Tb與β－二酮配基產(chǎn)生的熒光。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，其特征在于：所述樣品墊為檢測血清或血漿的樣品墊，或者為檢測全血的樣品墊。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，其特征在于：本檢測卡利用豬血樣品中豬圓環(huán)病毒抗體、豬圓環(huán)病毒抗原的標記物和硝酸纖維素膜上包被豬圓環(huán)病毒抗原通過雙抗原夾心法來檢測豬血樣本中豬圓環(huán)病毒抗體。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡，其特征在于：本檢測卡為定量層析檢測卡，它是通過檢測儀檢測層析后檢測卡的檢測線和質(zhì)控線發(fā)出的熒光信號，然后根據(jù)此批檢測卡的IC卡儲存的標準曲線，再由檢測線和質(zhì)控線的熒光信號從標準曲線計算出待檢物的濃度。

8.一種豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡的制備方法，其特征在，包括以下步驟：

步驟一，把硝酸纖維素膜粘貼在PVC底板上，并在硝酸纖維素膜上噴涂已稀釋至0.2～0.5mg/ml的羊抗雞lgY的lgG形成質(zhì)控線和已稀釋至0.3～1.0mg/ml的豬圓環(huán)病毒抗原形成檢測線，烘制后備用；

步驟二，用封閉液封閉硝酸纖維素膜10～30分鐘，用10mM磷酸緩沖液清洗硝酸纖維素膜10～30分鐘，干燥后備用；

步驟三，制備標記有雞lgY的鑭系熒光微球和標記有豬圓環(huán)抗原的鑭系熒光微球；

步驟四，把標記有雞lgY和標記有豬圓環(huán)抗原的鑭系熒光微球并分別稀釋至濃度0.05～0.4μg/ml和1～8μg/ml，并將其噴涂在載體基層上構(gòu)成標記墊，烘制后備用；

步驟五，把樣品墊、標記墊、吸水紙依次粘在PVC底板上，組裝成大卡，再用剪切機切割成試紙條，裝配在檢測卡外殼內(nèi)，即得到豬圓環(huán)病毒抗體檢測卡。