[發明專利]一種能抑制黑色素瘤的羊棲菜提取物

在審

• 申請號: 201610031931.7
• 申請日: 2016-01-18
• 公開（公告）號: CN105616449A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發明（設計）人: 錢國英;丁浩淼;汪財生;陳煜;郭海杰;謝琰;顧筱筱
• 申請（專利權）人: 浙江萬里學院
• 主分類號: A61K36/03
• 分類號: A61K36/03;A61P35/00
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 胡志萍

1.一種能抑制黑色素瘤的羊棲菜提取物，其特征在于制備方法如下：

將新鮮的羊棲菜洗凈后在40-50℃下烘干3.5-5小時，然后粉碎成粒度≤60目的羊 棲菜粉末；

向微波超聲波組合萃取儀中加入羊棲菜粉末和蒸餾水，微波超聲時間為8-12min， 溫度45-55℃、固液比1:8-12g/mL、超聲功率550-650W、微波功率350-450W；

抽濾后取濾液，45-55℃下濃縮至原體積的十分之一，加入無水乙醇使含醇量達 30-40％，靜置24h，過濾取濾液，45-55℃下濃縮至原體積的五分之一，加入無水乙醇使 含醇量達到80％，靜置24h，在10000-14000rpm下離心12-18min，取沉淀物；

將沉淀物在-0.08～-0.1MPa下真空干燥，溫度為28-32℃，時間10-14h；

將干燥后的沉淀物溶于水中，配成濃度為4-6wt％的水溶液作為工作液，將工作液 與Sevage試劑按1:2混合，振搖13-17min，3500-4500rpm下離心4-6min，取上清液；

其中Sevage有機試劑為氯仿：正丁醇＝4:1(v/v)的混合物；

將得到的上清液在DEAE-52陰離子交換纖維柱進行吸附洗脫，洗脫條件為：緩沖 體系為pH值7.2-7.4的磷酸鹽緩沖液，用含0-2M的NaCl溶液等梯度洗脫DEAE-52陰 離子交換纖維柱，流速為1mL/min，在波長為215nm下監測洗脫液中提取物含量，見峰 收集；收集0.5M～1.0MNaCl下的洗脫液，然后在3.5KD切向流超濾膜下膜濃縮脫鹽至 原體積的五分之一，真空冷凍干燥，真空度130Pa，溫度為-80℃，時間為48h；即得到 能抑制黑色素細胞瘤的羊棲菜提取物。

2.根據權利要求1所述的能抑制黑色素瘤的羊棲菜提取物，其特征在于分別收集 0.5M、0.75M和1MNaCl下的洗脫液。

3.根據權利要求2所述的能抑制黑色素瘤的羊棲菜提取物，其特征在于收集 0.5MNaCl下的洗脫液。