[發明專利]一種交聯紅松籽源抗氧化肽磁性微球及其制備方法

在審

• 申請號: 201610031167.3
• 申請日: 2016-01-18
• 公開（公告）號: CN105688768A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 林松毅;楊亞楠;黃延軍
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: B01J13/14
• 分類號: B01J13/14;B01J13/06;H01F1/42
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 王淑秋;王恩遠

技術領域

本發明屬于農產品精深加工及其副產物綜合應用技術領域，具體涉及一種交 聯紅松籽源抗氧化肽磁性微球及其制備方法。

背景技術

磁性高分子微球簡稱為磁性微球。它是通過物理或化學方法將磁性物質與高 分子物質復合而形成的具有一定磁性或特殊結構的材料。常用的磁性物質主要有 鐵酸鹽、純鐵粉、Fe₃O₄等，其中Fe₃O₄得到最廣泛的應用。磁性微球不僅可以 通過表面改性等化學反應在其表面引入多種反應性功能基團，也可以通過共價鍵 等方式結合酶、抗體等生物活性物質，在外加磁場作用下進行快速運動及分離， 因此其能夠在精細化工、食品、細胞學等領域表現出較好的前景。近年來研究適 用于各個領域的磁性微球已經成為各專家、學者研究的一個熱點。

自70年代中期以來，磁性高分子微球作為新型功能高分子材料，不但在細 胞分離、親和色譜、核酸研究、固定化酶等領域得到了廣泛研究，而且在有機和 生化合成、環境、食品微生物檢測等方面的應用研究也日益增多。目前，磁性微 球的合成方法主要有：包埋法、單體共聚法、化學轉化法、共沉淀法和硅烷化法 等。這些方法大都條件嚴苛，步驟繁瑣，能耗大且成本高。

目前，磁性微球作為靶向給藥廣泛應用于各個領域，大多是結合抗癌藥物， 而其結合抗氧化活性肽的關鍵技術亟待攻克。通過將磁性微球與抗氧化肽進行交 聯，在外加磁場的作用下，在體內進行定向移動靶向給藥，實現磁性微球與肽的 分離，操作簡便，分離方法遠高于其他常規方式，并且具有控制可持續釋放等多 種作用。因此，一種結合抗氧化肽的的磁性微球技術亟待攻克。

紅松籽為紅松的種子，含人體必需的8種氨基酸，含有的氨基酸種類較齊 全，其中谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸含量較高，對人體機能調節具有重要作用。 與國際衛生組織規定的人體氨基酸標準比較，紅松籽在大多數指標上符合標準， 各種氨基酸組成均衡。并且，其含有不飽和脂肪酸、磷脂等活性成分，具有提高 機體免疫力，防止血脂沉積，降低膽固醇，預防動脈粥樣硬化，抗衰老，抗疲勞， 抗輻射以及減肥的作用。紅松籽是一種良好的植物蛋白資源，目前大多數研究僅 限于其榨油的功效，其產品也多為干果飲料等形式。隨著生活水平的提高，越來 越多的人開始關注其含有的豐富蛋白資源。研究發現，其肽粉具有良好的抗氧化 活性，可通過清除自由基和抑制脂質過氧化，調整和改善人體生理功能，從而達 到預防和治療慢性疾病的目的。

復合多肽磁性微球是指多肽為材料制備的表面連接有特殊功能基團的磁性 高分子微球。由于磁性微球可直接或間接地與生物大分子進行交聯，并且其在外 加磁場的作用下對目標物質能進行有效富集、分離、回收和再利用，因此在生物 學領域有著廣泛的應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種磁性良好、制備方法簡便、成本低的交聯紅松籽源 抗氧化肽磁性微球及其制備方法。

本發明提供一種交聯紅松籽源抗氧化肽磁性微球的制備方法，其步驟如下：

1)、在三頸瓶中加入摩爾濃度為1～5mol/L的對苯二酚100～200mL，攪拌均 勻后依次滴加1～5mL、質量分數35～40％的鹽酸水溶液和10～20mL、質量分數 30～50％的甲醛水溶液；然后升溫到70～80℃攪拌下反應1～2h，自然冷卻至室溫， 用緩沖液洗滌至中性，抽濾，除去濾液，將濾渣真空冷凍干燥后研磨得到凝膠；

所述緩沖液為混合磷酸鹽、Tris-HCl、甘氨酸-氫氧化鈉中的一種；

所述真空冷凍干燥，是將濾渣分裝于冷凍盤中，厚度5～15mm，置于預凍 溫度為-75℃～-80℃冷凍庫中，預凍時間為5～6h后；然后再移至真空冷凍干 燥機中，溫度設定為-60℃～-50℃，凍干時間為10～24h，研磨后即獲得凝膠；

2)、以步驟1)所得凝膠、硫酸鐵、硫酸亞鐵為原料制備四氧化三鐵磁性微 球；

將30～50mL、摩爾濃度0.1～0.3mol/L的硫酸亞鐵溶液和10～30mL、摩爾濃 度0.1～0.3mol/L的硫酸鐵溶液混合，混合均勻后加入1～5g的步驟1)制備的凝 膠，然后升溫至60～80℃，再滴加NaOH溶液使反應體系pH>11，反應1～2h后， 自然冷卻至室溫，用稀鹽酸中和至中性，抽濾，除去濾液，將濾渣真空冷凍干燥 后研磨得到四氧化三鐵磁性微球；