[發明專利]一種中成藥“二丁顆?！盚PLC指紋圖譜的構建方法

有效

• 申請號: 201610030725.4
• 申請日: 2016-01-18
• 公開（公告）號: CN105699506B
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 徐云;任晶;趙源慧;白冰;徐建;趙俞
• 申請（專利權）人: 吉林修正藥業新藥開發有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 吉林省長春市新時代專利商標代理有限公司22204
• 代理人: 孫國振

1.一種中成藥“二丁顆粒”HPLC特征圖譜的構建方法，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：取本二丁顆粒研細粉末2～5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％～100％的甲醇溶液10～50ml，稱定重量，超聲提取20～40分鐘，再稱定重量，用上述溶劑補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

(2)對照品溶液的制備：取秦皮乙素對照品適量，用50％～100％的甲醇溶液溶解，制成每1ml含秦皮乙素20μg的溶液，即得；

(3)測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～20μl，注入高效液相色譜儀，即得“二丁顆?！钡闹讣y圖譜；

步驟(3)中，所述高效液相色譜測定的色譜條件為：

以AgilentZORBAX SB-C18，5μm，4.6×250mm，柱為色譜柱，流動相A為甲醇，流動相B為0.4％磷酸水溶液，梯度洗脫，流動相A、B的比例變化為：0～5min，A相5％～22％，B相95％～78％；5～15min，A相22％～25％，B相78％～75％；15～25min，A相25％～28％，B相75％～72％；25～40min，A相28％～30％，B相72％～70％；40～50min，A相30％～40％，B相70％～60％；50～60min，A相40％～45％，B相60％～55％；60～75min，A相45％～60％，B相55％～40％。

2.根據權利要求1所述的一種中成藥“二丁顆粒”HPLC指紋圖譜的構建方法，其最佳構建方法如下：

(1)供試品溶液的制備：取二丁顆粒研細粉末5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，稱定重量，超聲提取30分鐘，再稱定重量，用70％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；

(2)對照品溶液的制備：取秦皮乙素對照品適量，用70％的甲醇溶液溶解，制成每1ml含秦皮乙素20μg的溶液，即得；

(3)測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～20μl，注入高效液相色譜儀，即得“二丁顆?！钡闹讣y圖譜；

步驟(3)中，所述高效液相色譜測定的色譜條件為：

以Agilent ZORBAX SB-C18，5μm，4.6×250mm柱為色譜柱，流動相A為甲醇，流動相B為0.4％磷酸水溶液，梯度洗脫，流動相A、B的比例變化為：0～5min，A相5％～22％，B相95％～78％；5～15min，A相22％～25％，B相78％～75％；15～25min，A相25％～28％，B相75％～72％；25～40min，A相28％～30％，B相72％～70％；40～50min，A相30％～40％，B相70％～60％；50～60min，A相40％～45％，B相60％～55％；60～75min，A相45％～60％，B相55％～40％。