[發明專利]一種抑制水稻OsRboh(LOC_Os01g25820)基因的amiRNA有效
| 申請號： | 201610028696.8 | 申請日： | 2016-01-18 |
| 公開（公告）號： | CN105462983B | 公開（公告）日： | 2023-04-07 |
| 發明（設計）人： | 賀浩華;胡麗芳;劉世強;朱昌蘭;歐陽林娟;彭小松;陳小榮;賀曉鵬;傅軍如;邊建民;徐杰;孫曉棠;周大虎 | 申請（專利權）人： | 江西農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/12 |
| 代理公司： | 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901 | 代理人： | 張海青 |
| 地址： | 330045 江西省南*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 抑制 水稻 osrboh loc_os01g25820 基因 amirna | ||
【權利要求書】：
1.包含沉默水稻OsRboh(LOC_Os01g25820)基因amiRNA的載體的應用，其特征在于，用于改變水稻葉色及育性，所述OsRboh(LOC_Os01g25820)基因amiRNA的DNA序列如SEQ?IDNO.1所示；
包含沉默水稻OsRboh(LOC_Os01g25820)基因amiRNA的載體的構建方法，按以下步驟進行：
(1)搜尋OsRboh(LOC_Os01g25820)基因的合適的amiRNA序列，OsRboh(LOC_Os01g25820)的序列如SEQ?ID?NO.4所示，靶標序列如SEQ?ID?NO.1所示；
(2)將amiRNA序列進行反向互補，然后第6位T變為A，第10位的T變為A，獲得amiRNA*，其DNA序列如SEQ?ID?NO.2所示；
(3)將OsRboh(LOC_Os01g25820)的amiRNA和amiRNA*序列替換OsmiR528前體中的amiRNA和amiRNA*序列，獲得OsRboh(LOC_Os01g25820)-amiRNA序列，其DNA序列如SEQ?IDNO.3所示；
(4)人工合成OsRboh(LOC_Os01g25820)-amiRNA序列，將其與PHB表達載體酶切連接，然后轉化大腸桿菌DH5α獲得目的載體PHB-OsRboh(LOC_Os01g25820)-amiRNA。
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