[發明專利]一種石油降解菌劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201610027788.4
• 申請日: 2016-01-09
• 公開（公告）號: CN105483058B
• 公開（公告）日: 2019-09-17
• 發明（設計）人: 趙升;韓龍江;耿曉;潘玉龍;劉欣禹;周瑞佳
• 申請（專利權）人: 國家海洋局北海環境監測中心
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;B09C1/10;C12R1/72;C12R1/06;C12R1/01;C12R1/645
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本發明涉及一種石油降解菌劑；還涉及一種上述石油降解菌劑的制備方法。本發明的石油降解菌劑的制備方法，包括以下步驟：(1)將惰性柄桿菌、近平滑假絲酵母、抗酚小短桿菌、球形節細菌以及鮭色鎖擲孢酵母菌種分別進行擴大培養至菌體濃度為10⁹～10¹⁰cfu/g，并按照3∶2∶2∶1∶1的質量比混合均勻，得混合菌種；(2)將混合菌種在液體發酵培養基中發酵48?60小時；(3)離心分離得粘稠狀菌體細胞；(4)將粘稠狀菌體細胞和0.9％NaCl溶液和海泥浸出液混勻；(5)添加營養物質后在4℃條件下密封保存。本發明對石油的降解率高。

技術領域

本發明屬于石油降解技術領域，尤其涉及一種石油降解菌劑；本發明還涉及一種上述石油降解菌劑的制備方法。

背景技術

隨著石油開發、船舶運輸及石油工業的日益發展，海上溢油事故頻繁發生，石油污染給海洋環境和海洋生態系統帶來了嚴重的危害，并能直接或間接的影響著人類的生存和可持續發展。據聯合國環境規劃署報告，每年流入海洋的石油為200萬噸至2000萬噸，石油污染已成為一個世界性的污染問題。2010年發生在墨西哥灣的泄油事件是美國歷史上最嚴重的海洋污染事件之一，其所造成的生態損傷和經濟損失不可估量。

溢油多發生在海上，隨著風浪漂移至海岸線的油品不僅造成嚴重環境污染，而且由于石油烴類污染物的潛在毒性和生物積累效應會導致近岸海域環境質量和生物種類多樣性指數嚴重下降，海洋生態系統遭受嚴重破壞，也會對水產業和旅游業造成巨大損失。

生物修復(Bioremediation)指利用生物特別是微生物來催化降解環境污染物，減小或最終消除環境污染的受控或自發過程，是在微生物降解基礎上發展起來的新興的環保技術。早在1972年，美國利用生物修復技術清除賓夕法尼亞州的Ambler管線泄露的汽油；之后1989年，美國大規模應用生物修復技術成功處理了阿拉斯加海灘的石油污染，從此生物修復技術開始成為環境科學的研究熱點與前沿。

生物修復的機理是依靠微生物細胞的吸收氧化作用，對污染物進行分解同化，將污染有機物轉變為細胞的組成部分，或者轉變成H₂O和CO₂排出體外，從而實現對有機污染的修復。與動物和植物相比，微生物具有比表面積大、繁殖快、適應性強、使用范圍廣等優點，具有強大的降解與轉化能力。目前，利用微生物進行污染環境的修復倍受國內外研究學者的重視，具體工作主要集中在尋找高效降解菌、提高污染物的可利用性以及為微生物提供更合適的環境三方面。該技術分為生物促進(biostimulation)和生物強化(bioaugmentation)兩大類型。生物促進法是通過添加營養物或改變環境因子，以促進微生物的代謝能力。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術中的不足，并提供一種石油降解菌劑及其制備方法，旨在通過生物修復方式對海底石油污染進行有效修復，提高石油降解能力，為解決石油污染問題提供突破點。

為了解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：

一種石油降解菌劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)將惰性柄桿菌、近平滑假絲酵母、抗酚小短桿菌、球形節細菌以及鮭色鎖擲孢酵母菌種分別進行擴大培養至菌體濃度為10⁹～10¹⁰cfu/g，將惰性柄桿菌、近平滑假絲酵母、抗酚小短桿菌、球形節細菌以及鮭色鎖擲孢酵母按照3∶2∶2∶1∶1的質量比混合均勻，得混合菌種；

(2)將液體發酵培養基高壓滅菌15-30min，在無菌操作臺中，向滅菌處理的液體發酵培養基中接種步驟(1)所得的混合菌種，混合菌種與液體發酵培養基的重量比為1∶10-15，將接種了混合菌種的液體發酵培養基置于恒溫水浴搖床，在140rpm、27-30℃條件下連續發酵48-60小時；

(3)用酵母分離離心機離心分離除去發酵液中的水，把離心獲得的粘稠狀菌體充分攪拌以混合均勻，獲得粘稠狀菌體細胞；