[發(fā)明專利]一種多肽純化制備的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610024812.9
• 申請日: 2016-01-15
• 公開（公告）號: CN105504005A
• 公開（公告）日: 2016-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張德志;趙晶;徐紅巖
• 申請（專利權(quán)）人: 上海吉爾多肽有限公司;吉爾生化（上海）有限公司
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/18
• 代理公司: 上海浦東良風(fēng)專利代理有限責(zé)任公司 31113
• 代理人: 張勁風(fēng)

1.一種多肽純化制備的方法，其特征是包括以下步驟：

1）多肽粗品溶解在醋酸、乙腈水溶液中，超聲處理，濾膜過濾，取濾液待用；

2）利用反相高效液相色譜系統(tǒng)，對過濾后的多肽粗品進(jìn)行分離純化，制備動態(tài)軸向壓縮柱，流動相A為質(zhì)量百分濃度100%乙腈溶液，流動相B為質(zhì)量百分濃度0.1%-0.3%醋酸水溶液，進(jìn)行梯度洗脫分離純化，采用紫外檢測器對樣品進(jìn)行檢測，分段收集目的峰值的肽溶液；乙腈廢液進(jìn)入乙腈廢液回收處理流程；

3）將分離純化后得到的高純度目的肽溶液進(jìn)行減壓旋蒸濃縮，濃縮液收集待用；乙腈廢液進(jìn)入乙腈廢液回收處理流程；

4）將濃縮液經(jīng)過反相動態(tài)軸向壓縮柱，采用離子交換法轉(zhuǎn)成醋酸鹽；乙腈廢液進(jìn)入乙腈廢液回收處理流程；

5）將轉(zhuǎn)好醋酸鹽合格產(chǎn)品進(jìn)行減壓旋蒸濃縮、冷凍干燥，得到白色絮狀粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測合格即為最終產(chǎn)品；乙腈廢液進(jìn)入乙腈廢液回收處理流程；

步驟2）、3）、4）、5）所述乙腈廢液回收處理流程：乙腈廢液進(jìn)入廢液儲罐，將廢液儲罐內(nèi)的乙腈廢液通過抽真空，轉(zhuǎn)移至精餾塔的塔釜內(nèi)，利用精餾塔，對乙腈廢液進(jìn)行精餾，收集高濃度的回收乙腈于儲罐內(nèi)，將檢測合格的回收乙腈通過磁力泵經(jīng)管道轉(zhuǎn)移至合格回收乙腈儲罐內(nèi)，供反相高效液相色譜系統(tǒng)循環(huán)使用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多肽純化制備的方法，其特征是：動態(tài)軸向壓縮柱內(nèi)裝固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠的反相硅膠。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多肽純化制備的方法，其特征是：步驟1）醋酸乙腈水溶液配置時體積比：醋酸∶乙腈∶水=1∶10∶40。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多肽純化制備的方法，其特征是：步驟4）中將濃縮液經(jīng)過反相動態(tài)軸向壓縮柱完成離子交換轉(zhuǎn)成醋酸鹽，所用到的流動相為20～50mmol醋酸緩沖鹽體系。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多肽純化制備的方法，其特征是：精餾塔塔體里裝填直徑為4mm的玻璃彈簧填料，塔體外接加熱循環(huán)器，內(nèi)接再沸器。