[發(fā)明專利]治療腦膠質(zhì)母細胞瘤的治療組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610021438.7
• 申請日: 2016-01-13
• 公開（公告）號: CN106967681B
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 嚴勇朝;朱益林;陳思毅
• 申請（專利權(quán)）人: 北京馬力喏生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/10;C12N7/01;C12N15/867;A61K48/00;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一種T淋巴細胞，其特征在于，所述T淋巴細胞的免疫檢查點PD1被沉默；

表達無功能EGFR受體；

以及表達嵌合抗原受體，其中，

所述嵌合抗原受體包括：

胞外區(qū)，所述胞外區(qū)包括單鏈抗體的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，所述單鏈抗體特異性識別抗原EGFRvIII；

跨膜區(qū)，所述跨膜區(qū)與所述胞外區(qū)相連，并且嵌入到所述T淋巴細胞的細胞膜中；

胞內(nèi)區(qū)，所述胞內(nèi)區(qū)與所述跨膜區(qū)相連，并且所述胞內(nèi)區(qū)包括CD28或4-1BB的胞內(nèi)段以及CD3ζ鏈；

所述T淋巴細胞是通過將攜帶含有SEQ ID NO：138、140或141所示的核苷酸序列的慢病毒導(dǎo)入受體T淋巴細胞中獲得的。

2.一種慢病毒，其特征在于，所述慢病毒攜帶含有SEQ ID NO：138、140或141所示的核苷酸序列。

3.一種轉(zhuǎn)基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞細胞免疫檢查點PD1被沉默；

表達無功能EGFR受體；以及表達嵌合抗原受體；

其中，所述嵌合抗原受體包括：

胞外區(qū)，所述胞外區(qū)能夠與抗原特異性結(jié)合，所述胞外區(qū)包括抗體的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，所述抗體為單鏈抗體，所述抗體結(jié)合所述抗原，所述抗原為EGFRvIII；

跨膜區(qū)；以及

胞內(nèi)區(qū)，所述胞內(nèi)區(qū)包括免疫共刺激分子胞內(nèi)段；

所述轉(zhuǎn)基因淋巴細胞是通過將權(quán)利要求2所述的慢病毒導(dǎo)入淋巴細胞后獲得。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的轉(zhuǎn)基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞是自然殺傷細胞。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的轉(zhuǎn)基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞是自然殺傷T細胞。

6.一種構(gòu)建體，其特征在于，所述構(gòu)建體包括：

第一核酸分子，所述第一核酸分子編碼嵌合抗原受體；

第二核酸分子，所述第二核酸分子沉默細胞免疫檢查點包括PD1；以及

第三核酸分子，所述第三核酸分子編碼無功能EGFR受體，

其中，所述構(gòu)建體攜帶含有SEQ ID NO：138、140或141所示的核苷酸序列。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的構(gòu)建體，其特征在于，所述第一核酸分子、所述第二核酸分子和所述第三核酸分子被設(shè)置為在權(quán)利要求3～5任一項所述的淋巴細胞中表達所述嵌合抗原受體、沉默細胞免疫檢查點和表達無功能EGFR受體，并且所述嵌合抗原受體與所述無功能EGFR受體呈非融合形式。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的構(gòu)建體，其特征在于，所述構(gòu)建體的載體是非致病性病毒載體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的構(gòu)建體，其特征在于，所述構(gòu)建體的載體是病毒載體，所述病毒載體包括選自反轉(zhuǎn)錄病毒載體、慢病毒載體或腺病毒相關(guān)病毒載體的至少之一。

10.一種用于治療癌癥的治療組合物，其特征在于，包括：

權(quán)利要求6～9任一項所述的構(gòu)建體、權(quán)利要求2所述的慢病毒、權(quán)利要求1所述的T淋巴細胞或者權(quán)利要求3～5任一項所述的轉(zhuǎn)基因淋巴細胞。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的治療組合物，其特征在于，所述癌癥包括腦膠質(zhì)母細胞瘤、非小細胞肺癌、乳腺癌或卵巢癌。