[發明專利]一種具有抗癌活性的OPB寡肽及其表達載體和應用

有效

• 申請號: 201610018929.6
• 申請日: 2016-01-12
• 公開（公告）號: CN105601724B
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 隋廣超
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/70;C12N15/66;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 侯靜

一種具有抗癌活性的OPB寡肽及其表達載體和應用，它涉及一種具有抗癌活性的寡肽及其表達載體和應用。本發明的序列為Gly?Asn?Lys?Lys?Trp?Glu?Gln?Lys?Gln?Val?Gln?Ile?Lys?Thr?Leu?Glu?Gly?Glu?Phe?Ser?Val?Thr?Met?Trp?Ser?Ser。它用于制備抗癌藥物。本發明構建了pMBP?2xOPB表達載體。本發明利用OPB序列合成出的肽段具有抑制腫瘤細胞生長增殖的效果，表明基于OPB的肽段及其衍生物是一種潛在的治療癌癥的藥物。

技術領域

本發明涉及一種具有抗癌活性的寡肽及其表達載體和應用。

背景技術

Yin Yang 1(YY1)是一個多功能蛋白，具有促進腫瘤細胞生長的活性。YY1帶有一個OPB(Oncoprotein Binding)區域(如圖1所示)，可以結合多個促進癌癥產生及發展的蛋白(癌蛋白)，包括AKT,Mdm2,E1A和Ezh2。

癌癥的發生與發展過程中伴隨著遺傳和表觀遺傳的改變。表觀遺傳是指那些在細胞分裂時不涉及DNA序列變化的可遺傳性狀。表觀遺傳可以協調遺傳學信息在分化與發育進程中的作用。這些調節的缺陷會導致人類的各種疾病，包括癌癥。YY1參與許多腫瘤形成過程中的表觀遺傳學調控機制。迄今為止，大多數的研究表明，YY1的生物學功能是刺激細胞增殖和癌癥的發生和發展。

YY1最早是由Shi等人做為一個含有414個氨基酸的DNA結合蛋白而被發現的。做為一個轉錄因子，YY1具有“陰陽(Yin Yang)”的特性，即可以抑制或激活靶基因的表達。YY1在DNA上的共有結合元件(consensus binding element)存在于脊椎動物的7％基因中，這意味著YY1在調節生物個體基因表達上的重要性。很多研究表明，YY1所調節的基因具有多種生物學功能，包括細胞生長，分化以及胚胎的發育。YY1可以結合多個參與表觀遺傳學的重要蛋白因子，包括調節組蛋白乙酰化的p300/CBP、PCAF、HDACs，組蛋白甲基化的Ezh2、Ezh1、PRMT4，DNA甲基化的DNMTs。因此，YY1是一個重要的表觀遺傳學調節因子。

在早期的研究中，人們對于YY1在癌癥發生中的作用一直不夠明確。直到2004年，我們發現了YY1可以負調節抑癌基因p53，其促癌或刺激細胞生長的功能才被意識到。隨后的多篇報道都證實了YY1抑制p53的功能，因而，YY1對p53的負調控成為認知YY1做為原癌基因的關鍵轉折。值得注意的是，YY1的這一功能并不依賴于其調節轉錄的活性，這也就擴展了YY1的功能或調節范圍。YY1做為轉錄因子促進原癌基因c-Myc和ERBB2/HER2的表達，YY1對原癌基因Ezh2功能的促進作用，多種生長因子刺激YY1基因表達的現象，以及YY1的啟動子帶有原癌基因標志性結構G-quadruplex等，被陸續發現。這些進一步牢固了YY1的原癌基因地位和增強了其做為癌癥治療中靶基因的可能性。

現有技術存在的問題：(1)細菌系統表達產物，可能會含有內毒素，但這個缺點可以通過使用針對去除內毒素的方法來解決。(2)基于DNA質粒的表達系統很難合成太小的多肽分子，因為難以進行分離純化。但合成2×OPB分子也有利于活性多肽的穩定性。

發明內容

本發明的目的是為了提供一種抗癌(尤其是乳腺癌)的物質，即提供一種具有抗癌活性的OPB寡肽及其表達載體和應用。

本發明的一種具有抗癌活性的OPB寡肽，其序列為Gly-Asn-Lys-Lys-Trp-Glu-Gln-Lys-Gln-Val-Gln-Ile-Lys-Thr-Leu-Glu-Gly-Glu-Phe-Ser-Val-Thr-Met-Trp-Ser-Ser。

本發明的一種具有抗癌活性的OPB寡肽，我們以乳腺癌為例，展示了該寡肽或其任意一部分寡肽可以用于制備治療癌癥的藥物。

本發明的一種具有抗癌活性的OPB寡肽的pMBP-2xOPB表達載體的構建，它是按照以下步驟構建的：