[發明專利]金針菇F101菌種的SSR標記引物及其指紋圖譜應用

有效

• 申請號: 201610017183.7
• 申請日: 2016-01-12
• 公開（公告）號: CN105506124B
• 公開（公告）日: 2019-05-31
• 發明（設計）人: 沈穎越;金群力;蔡為明;宋婷婷;范麗軍;馮偉林;李良英;田芳芳
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 杭州賽科專利代理事務所(普通合伙) 33230
• 代理人: 張劍英

本發明公開了一種金針菇F101菌種的SSR標記引物及其指紋圖譜應用，所述標記引物由引物名稱為Fvm1，Fvm2、Fvm3、Fvm4、Fvm5、Fvm6中的6對SSR引物中至少一對構成，其步驟如下：（1）菌絲固體培養、（2）基因組DNA的提取、（3）SSR分子標記的檢測、（4）電泳檢測、（5）菌種鑒定。本發明提供的SSR標記與常規形態學檢測、拮抗試驗、出菇試驗相比，具有檢測時間短，準確性高，重復性好的優點。

技術領域

本發明涉及菌種檢測鑒定領域，具體為一種金針菇F101菌種的SSR標記引物及其應用。

背景技術

金針菇（Flammulina velutipes(Fr.)Sing.）隸屬于真菌門，擔子菌亞門，層菌綱，無隔擔子菌亞綱，傘菌目，口蘑科，小火焰菌屬，因形似金針菜而得名。金針菇又稱構菌、、金菇、攝茸、毛柄金錢菌和冬菇。金針菇的自然分布很廣泛。金針菇作為一種食用菌，是當今市場上十分走俏的天然保健食品之一。白金針菇蛋白質含量高，氨基酸種類豐富，具有抗癌功能，經常食用具有預防高血壓、治療肝病和胃潰瘍等功效。金針菇特別以富含賴氨酸而著稱，可以活化神經細胞，促進智力發育，素有“增智菇”之美稱。金針菇也是中國主要栽培食用菌和現代工廠化生產主要食用菌之一，2013年國內工廠化日生產量達到2700噸。

優質菌種在金針菇單產和質量中的貢獻率舉足輕重，這決定了金針菇菌種在金針菇產業 中的重要地位。1999年我國簽署了《國際植物新品種保護法》，這不僅要求我們尊重其它國 家的品種知識產權，同時也要加強保護我們國家自己的品種知識產權，為了建立食用菌新品 種登記制度來真正保護我國的品種產權，必須首先建立成熟的品種鑒定技術，為新品種登記 奠定基礎。尤其日本2004年4月1日開始實行《種苗法修正案》，對我國食用菌尤其是金針 菇的生產構成了極大的威脅。就國內而言，金針菇栽培菌種“同種異名，異種同名”的現象， 不僅給菇農帶來了極大的損失，影響了他們的栽培積極性，也極大地影響了中國金針菇產業 的發展；而且，隨著大規模的工廠化栽培方式的出現，對金針菇栽培菌株質量的要求越來越 高，需要發展更為簡便、快速、準確的菌株鑒定技術，以保證每批次的用種都準確無誤。面對這種局勢，就需要我們進一步加快菌種鑒定技術的研究，在金針菇的研究中建立更為有效的菌種鑒定體系。

發明內容

針對上述問題，本發明提供了一種金針菇F101菌種的SSR標記及指紋圖譜應用。該標記與常規形態學檢測、拮抗試驗、出菇試驗相比，具有檢測時間短，準確

性高，重復性好的優點。

本發明第一目的在于提供一種金針菇F101菌種的SSR標記引物，所述標記引物由名稱為Fvm1，Fvm2、Fvm3、Fvm4、Fvm5、Fvm6的6對SSR引物中至少一對構成；所述6對引物的正反核苷酸序列如下：

Fvm1：GAGGCGTCACCAAGGGATG，CTCAAAGGAATGCGCTGCA；

Fvm2：TTTCGCGCAGGTTTGG，TTGTGAGGGGACGGGTATG；

Fvm3：GTGAAGAAGAATAAGAGGGAGC，TGAGACTAGTGATGACGATGAAG；

Fvm4：TCATCTGTCCATTCATCATCA，GTTCAACACATTCACGCAA；

Fvm5：CAGCCCATTTTTCCACCC，CGAAGATTCCATTGACGATTTC；

Fvm6：CATTGTTCCTTCAGTCCGAGA，TTCCATCCGAATCCGTAGC。

F101是浙江省農科院育成的黃色工廠化金針菇品種，該品種，桿直較整齊，周期短（比白色品種工廠化快4天）、首潮產量稍低，但其仍有潛力，一般工廠化品種僅可收一茬，該菌株可以采收兩茬，回潮快，二潮產量可接近第一潮，品質接近。