[發(fā)明專利]用于制備基于乳的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610014090.9 | 申請日： | 2010-03-31 |
| 公開（公告）號： | CN105661553A | 公開（公告）日： | 2016-06-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | P.R.奧斯特加德;S.厄恩斯特;G.B.林格萊夫 | 申請（專利權(quán)）人： | 諾維信公司 |
| 主分類號： | A23L33/18 | 分類號： | A23L33/18;A23L33/19;C12N9/52;C12N9/58;C12N9/64;C12N9/76 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494 | 代理人： | 史悅 |
| 地址： | 丹麥*** | 國省代碼： | 丹麥;DK |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 制備 基于 蛋白質(zhì) 水解 產(chǎn)物 方法 | ||
1.一種用于制備基于乳的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的方法，其包括用a)自微生物 生成的胰蛋白酶樣內(nèi)肽酶和b)至少一種自微生物生成的其它內(nèi)肽酶處理基 于乳的蛋白質(zhì)材料的溶液。
2.依照權(quán)利要求1的方法，其中該胰蛋白酶樣內(nèi)肽酶源自鐮孢屬 (Fusarium)的菌株。
3.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該胰蛋白酶樣內(nèi)肽酶選自下組：
i)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列與SEQIDNO:2、4或6任一 的成熟多肽具有至少60％同一性；
ii)由多核苷酸編碼的多肽，所述多核苷酸在至少低嚴(yán)格條件下與下述 雜交：(i)SEQIDNO:1、3或5任一的成熟多肽編碼序列，(ii)包含SEQIDNO: 1、3或5任一的成熟多肽編碼序列的基因組DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全長 互補鏈；
iii)由多核苷酸編碼的多肽，所述多核苷酸包含與SEQIDNO:1、3或5 任一的成熟多肽編碼序列具有至少60％同一性的核苷酸序列；和
iv)SEQIDNO:2、4或6任一的成熟多肽的包含一個或多個(幾個)氨基酸 的取代、缺失、和/或插入的變體。
4.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中胰蛋白酶樣內(nèi)肽酶對基于乳的 蛋白質(zhì)的比例為0.01-10％重量/重量、優(yōu)選0.01-5％、更優(yōu)選0.05-2.5％、甚至 更優(yōu)選0.5-1％。
5.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該至少一種其它內(nèi)肽酶對在酪 氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸和組氨酸的羧基末端側(cè)處的切 割具有比在精氨酸和賴氨酸的羧基末端側(cè)上的切割更高的特異性。
6.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該至少一種其它內(nèi)肽酶具有至 少3的糜蛋白酶比例。
7.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該至少一種其它內(nèi)肽酶是源自 擬諾卡氏菌屬(Nocardiopsis)、綠僵菌屬(Metarhizium)或小枝孢屬 (Brachysporiella)的菌株。
8.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中該至少一種其它內(nèi)肽酶選自下 組：
i)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列與SEQIDNO:8、10或12任 一的成熟多肽具有至少60％同一性；
ii)由多核苷酸編碼的多肽，所述多核苷酸在至少低嚴(yán)格條件下與下述 雜交：(i)SEQIDNO:7、9或11任一的成熟多肽編碼序列，(ii)包含SEQIDNO: 7、9或11任一的成熟多肽編碼序列的基因組DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全長 互補鏈；
iii)由多核苷酸編碼的多肽，所述多核苷酸包含與SEQIDNO:7、9或11 任一的成熟多肽編碼序列具有至少60％同一性的核苷酸序列；和
iv)SEQIDNO:8、10或12任一的成熟多肽的包含一個或多個(幾個)氨基 酸的取代、缺失、和/或插入的變體。
9.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中至少一種其它內(nèi)肽酶對基于乳 的蛋白質(zhì)的比例為0.001-1％重量/重量、優(yōu)選0.001-0.5％、更優(yōu)選0.005-0.25％、 甚至更優(yōu)選0.02-0.1％。
10.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中基于內(nèi)肽酶的重量，以胰蛋 白酶樣內(nèi)肽酶添加濃度的2％-50％的濃度添加該至少一種其它內(nèi)肽酶。
11.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中在約40℃至60℃的溫度，在 范圍6.5至8.5的pH值在1至6小時的過程中進行水解。
12.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中獲得的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物具有 5-30％、優(yōu)選10-25％和更優(yōu)選12-20％的水解程度。
13.依照前述權(quán)利要求任一項的方法，其中獲得的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物由肽 構(gòu)成，其中以重量計，少于1％具有20,000kDa以上的分子量。
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