[發明專利]一種酶法再生ATP的方法

在審

• 申請號: 201610009080.6
• 申請日: 2016-01-06
• 公開（公告）號: CN105463043A
• 公開（公告）日: 2016-04-06
• 發明（設計）人: 劉珞;李成成;王崢
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: C12P19/32
• 分類號: C12P19/32;C12N9/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種通過以谷氨酸棒狀桿菌來源的多聚磷酸激酶生產ATP的方法，其特征在 于，包括：

步驟1、克隆多聚磷酸激酶基因至表達載體，得到重組質粒，經IPTG誘導表 達。

步驟2、將細胞破碎后得到的多聚磷酸激酶，在Tris-HCl緩沖鹽體系和輔因子 Mg²⁺存在下，以多聚磷酸鹽和ADP為底物，多聚磷酸激酶催化生成ATP。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于多聚磷酸激酶PPK的如序列1所示 的核酸序列。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于多聚磷酸激酶PPK的如序列2所示 的氨基酸序列。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于反應體系以谷氨酸棒狀桿菌來源的 多聚磷酸激酶PPK催化再生ATP。

5.根據權利要求1所述方法，其特征在于反應體系由常見的低聚合度磷酸及其 鹽，包括三聚磷酸鈉、四聚磷酸鈉、六偏磷酸鈉，等等，作為多聚磷酸激酶的底 物和磷酸供體。

6.根據權利要求1所述方法，其特征在于反應溫度范圍為25～37攝氏度。

7.根據權利要求1所述方法，其特征在于反應中添加的多聚磷酸鹽對多聚磷酸 激酶沒有明顯的底物抑制，多聚磷酸濃度范圍為10～500mM。

8.根據權利要求1所述方法，其特征在于ATP(ADP)濃度范圍為1～50mM。

9.根據權利要求1所述方法，其特征在于反應pH范圍為6～9。

10.根據權利要求1所述方法，其特征在于ATP可再生2～100個循環。