[發(fā)明專利]一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610006130.5
• 申請日: 2016-01-06
• 公開（公告）號: CN105524133B
• 公開（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳葵;朱家文;劉慧;牛夢旗;應(yīng)喜平;楊生武
• 申請（專利權(quán)）人: 華東理工大學
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 上?？剖⒅R產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

1.一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法，其特征在于，該工藝方法包括以下步驟：

(1)三級逆流洗滌：用磷酸鹽溶液三級逆流洗滌含有必特螺旋霉素的酯提取液，得到含有必特螺旋霉素的洗后酯溶液；

(2)第一次反萃：用磷酸鹽溶液反萃含有必特螺旋霉素的洗后酯溶液，靜置分液，得含有必特螺旋霉素的一次水提液；

(3)酯萃?。河悯ポ腿『斜靥芈菪顾氐囊淮嗡嵋?，靜置分液，得到濃縮必特螺旋霉素的酯萃取液；

(4)第二次反萃：用磷酸鹽溶液反萃濃縮必特螺旋霉素的酯萃取液，靜置分液，得含有必特螺旋霉素的二次水提液；

(5)結(jié)晶：向含有必特螺旋霉素的二次水提液中，加入乙醇，滴加堿液結(jié)晶，得到必特螺旋霉素成品；

用酯提取必特螺旋霉素發(fā)酵液得到含有必特螺旋霉素的酯提取液，含有必特螺旋霉素的酯提取液效價為7000-11000u/ml；

步驟(5)所述的結(jié)晶步驟中，首先調(diào)節(jié)含有必特螺旋霉素的二次水提液的pH至4.5-5.5，向含有必特螺旋霉素的二次水提液中持續(xù)鼓入空氣，以去除微量酯，得到必特螺旋霉素的結(jié)晶液，然后向必特螺旋霉素的結(jié)晶液中加入乙醇，向結(jié)晶液中加入乙醇的量為結(jié)晶液質(zhì)量的6％-10％，滴加堿液結(jié)晶，得到必特螺旋霉素成品；

結(jié)晶過程中首先使用0.8～1.2mol/l的堿液滴定結(jié)晶液至剛出現(xiàn)沉淀，然后改用濃度為0.05～0.15mol/l的堿液繼續(xù)滴加結(jié)晶，控制結(jié)晶終點pH值為7.5-8.0。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法，其特征在于，步驟(1)所述的三級逆流洗滌步驟中，三級逆流洗滌的溫度為15～25℃，洗滌相比為水相:酯相＝1:1～1:2；

逆流洗滌所用磷酸鹽溶液為質(zhì)量分數(shù)0.7％-1％的NaH₂PO₄溶液；

含有必特螺旋霉素的洗后酯溶液效價為5000-9000u/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法，其特征在于，步驟(2)所述的第一次反萃步驟中，反萃相比為水相：酯相＝1:3.5-1:4.5，并調(diào)整水相pH至3.5-4.0，靜置分液，使含有必特螺旋霉素的一次水提液效價為20000-26000u/ml；

第一次反萃步驟中，所用磷酸鹽溶液為pH＝2.0-2.3、質(zhì)量分數(shù)為0.5-1.0％的NaH₂PO₄溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法，其特征在于，步驟(3)所述的酯萃取步驟中，用酯萃取前，調(diào)節(jié)含有必特螺旋霉素的一次水提液pH至6.8-7.0，酯萃取時萃取相比為水相：酯相＝3:1-5:1，使?jié)饪s必特螺旋霉素的酯萃取液效價為75000-98000u/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法，其特征在于，步驟(4)所述的第二次反萃步驟中，反萃相比為酯相：水相＝1:3-1:5，并調(diào)節(jié)水相的pH至2.8-3.0，靜置分液，使含有必特螺旋霉素的二次水提液效價為13000u/ml-18000u/ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分離提純必特螺旋霉素的工藝方法，其特征在于，結(jié)晶完成后，進行抽濾，干燥，得到必特螺旋霉素成品。