[發明專利]一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法

在審

• 申請號: 201610004919.7
• 申請日: 2016-01-05
• 公開（公告）號: CN105647816A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 穆平;常樂;王春華
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12Q1/18
• 代理公司: 北京國智京通知識產權代理有限公司 11501
• 代理人: 孫文彬

1.一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于，所述的鑒定方法的具 體步驟如下：

禾谷鐮刀菌培養：在25％PDA培養基環境下培養禾谷鐮刀菌7天，切3毫米 見方的帶有菌絲的PDA塊7-10塊，放入150mL2％的綠豆湯培養基，置于搖床以 150rpm的速度培養7天，使其產孢，制作孢子懸浮液，過濾得到孢子，加入無 菌水使其濃度達到5x10⁵個/mL，放4℃冰箱保存；

麥穗離體培養：剪小麥麥穗放入培養盒內(含穗長，長度為23-25cm)，培 養盒內注水，水深4-5cm；每5支麥穗放入一個培養盒內間隔網中；共需培養5 天，可根據實際情況在第三天的時候換水、剪去泡在水中的麥梗部；

抗病實驗：使用異形注射器，采用單花滴注法將10微升孢子懸浮液注射在 麥穗中部小穗，將接種的小麥放入培養盒中，恒溫25℃，恒濕90％，24小時后 將濕度調低至70％，連續培養，記錄第五天數據。

2.如權利要求1所述的一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于： 所述的麥穗離體培養中麥穗培養盒為自制培養盒，所述的麥穗培養盒具有多層 結構，包括了培養盒盒體、培養盒盒蓋、培養室、可調節間隔網、恒溫恒濕組 件室、注射器室、溫度-濕度感應器、透氣孔、控制中心，所述的培養盒盒體與 培養盒盒蓋通過鉸鏈連接，所述的培養盒盒體中設置有培養室、恒溫恒濕組件 室和注射器室，所述的恒溫恒濕組件室和注射器室位于培養室下方，所述的溫 度-濕度感應器安裝于培養室內，所述的透氣孔和控制中安裝于培養盒盒蓋內 側。

3.如權利要求1或2所述的一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在 于：所述的異形注射器注射針內直徑為0.2mm，前口封閉，設置6-8個注射孔在 注射針壁，分布在針壁1.5cm范圍內，注射孔直徑為0.1mm。

4.如權利要求3所述的一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于： 所述的鑒定方法還包括有鑒定標準，所述的鑒定標準如下：

0級:沒有可見癥狀；

1級:l個病小穗；

2級:2個病小穗；

3級:3個病小穗；

4級:大于3個病小穗小于1/4的穗面積；

5級:病穗小于l/3的穗面積；

6級:小于1/2的穗面積；

7級:小于2/3的穗面積,梗部輕微變色；

8級:小于3/4的穗面積,局部梗變色；

9級:大于3/4的穗面積,擴展性梗變色,穗枯死；

由所調查的病級計算各品種每次調查的病情指數,具體公式為:

病情指數(％)＝∑ax/nT×100,其中:a為發病級數；x為發病穗數；n為發病 最高級數(9)；T為調查樣本數。