[發明專利]從大豆中提取葉酸的方法有效
| 申請號： | 201610004854.6 | 申請日： | 2016-01-05 |
| 公開（公告）號： | CN105440036B | 公開（公告）日： | 2017-03-08 |
| 發明（設計）人： | 張玲;孟繁磊;張原宇;王玉民;李海云;邢國杰;董英山 | 申請（專利權）人： | 吉林省農業科學院 |
| 主分類號： | C07D475/04 | 分類號： | C07D475/04;G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京世譽鑫誠專利代理事務所(普通合伙)11368 | 代理人： | 孫國棟 |
| 地址： | 133000 吉*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 大豆 提取 葉酸 方法 | ||
【權利要求書】：
1.從大豆中提取葉酸的方法，包括以下步驟：
(1)大豆樣品制備：大豆種子粉碎獲取豆粉，稱取0.2g豆粉，置于AXYGENEP管中，在樣品中加入750μL葉酸提取緩沖液，95℃孵育15min置于冰上冷卻，加入5mm鋼珠(2粒)，在組織研磨機中研磨樣品，獲得樣品勻漿液；
(2)大豆葉酸提取：在步驟(1)樣品勻漿液中加入8μLα-淀粉酶和750μL葉酸提取緩沖液以避免粘稠，室溫放置10min，加入100μL蛋白酶，37℃孵育1h；100℃煮沸10min，冰上迅速冷卻10min；在4℃，14000rpm條件下，離心10min；吸取上清，按照2％的體積比在上清中加入大鼠血清10μL，混勻后，于37℃培養2h；100℃煮沸滅活10min，冰上迅速冷卻10min；在4℃，14000rpm條件下，離心15min；吸取上清分裝于滅菌管中直接測定或凍存于-80℃，得大豆葉酸提取液。
2.根據權利要求1所述的從大豆中提取葉酸的方法，其特征在于，所述步驟(1)大豆樣品制備和步驟(2)大豆葉酸提取，均在避光條件下進行。
3.根據權利要求從1所述的從大豆中提取葉酸的方法，其特征在于，步驟(2)中所述緩沖液的組分為pH值6.5的50mM磷酸緩沖液中，加入1％的抗壞血酸鈉鹽，以及0.1％的2-巰基乙醇。
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