[發明專利]一種誘導浙貝母小鱗莖的組培方法有效
| 申請號: | 201610004006.5 | 申請日: | 2016-01-06 |
| 公開(公告)號: | CN105519435B | 公開(公告)日: | 2017-10-13 |
| 發明(設計)人: | 蔡寶昌;張彥南;金俊杰;秦昆明;陳丹妮;黃雨婷;范孟雪;鄭艷萍;陳林偉;王彬 | 申請(專利權)人: | 南京海源中藥飲片有限公司 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 南京經緯專利商標代理有限公司32200 | 代理人: | 楊海軍 |
| 地址: | 210061 江蘇省南*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 誘導 浙貝母 鱗莖 方法 | ||
1.一種誘導浙貝母小鱗莖的組培方法,其特征在于,它包括以下步驟:
(1)切取外植體:選取無病害的浙貝母鱗莖,剝開鱗片,從鱗莖基部切取浙貝母的芯芽,得到外植體;
(2)滅菌:用自來水沖洗浙貝母的芯芽15min,放入超凈工作臺,用體積濃度70%~75%乙醇消毒15~20s,用無菌水沖洗3~6次,再放入體積濃度為0.1~0.2%的升汞中滅菌5~15min,用無菌水沖洗3~6次,并用無菌濾紙吸干浙貝母的芯芽表面的水份;
(3)成苗培養:將滅菌后的浙貝母的芯芽接種于成苗培養基中培養,經培養后,芯芽抽莖成苗,高5~9cm;所述的成苗培養基由MS培養基,蔗糖30g/L和瓊脂6g/L組成,pH為5.5~6.5;成苗培養條件為:溫度22~26℃,光照強度2000~3000Lux,光照時間10~14h,培養時間為25~30天;
(4)誘導培養:將成苗接種于誘導培養基中培養,經誘導培養后,苗葉腋處逐漸出現白色膨大,統計小鱗莖誘導率;誘導培養基由MS培養基,1.5mg/L的NAA,0.5mg/L的KT,30g/L的蔗糖和6g/L瓊脂組成,pH為5.5~6.5;誘導培養條件為:溫度22~26℃,光照強度2000~3000Lux,光照時間10~14h,培養時間為20~30天;
(5)膨大培養:從葉片基部切取誘導培養出的小鱗莖,接種到膨大培養基上進行培養,膨大培養基為MS+蔗糖60g/L+瓊脂6g/L,pH為5.5~6.5,培養條件為:溫度22~26℃,光照強度2000~3000Lux,光照時間10~14h,培養時間為30~35天,統計小鱗莖膨大率,培養得到浙貝母小鱗莖。
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