[發明專利]用于肝癌術后預后評估的試劑盒和肝癌化療增敏劑

有效

• 申請號: 201610003402.6
• 申請日: 2016-01-04
• 公開（公告）號: CN105441566B
• 公開（公告）日: 2019-02-19
• 發明（設計）人: 舒廣文;向梅先;蘇漢文;蘇琪元;黃旭
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11;A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 吳泳歷

本發明“用于肝癌術后預后評估的試劑盒”，涉及生物醫藥領域，包括用于定量檢測待測肝組織中微小RNA分子miR?653表達水平的試劑；所述miR?653的核苷酸序列如Seq ID No.1所示。所述肝癌化療增敏劑，其有效成分包括人工制備的微小RNA分子miR?653、微小RNA分子miR?653的前體，或可在肝癌組織中有效表達微小RNA分子miR?653和/或miR?653前體的過表達載體；所述微小RNA分子miR?653的核苷酸序列如Seq ID No.1所示；所述微小RNA分子miR?653前體由Seq ID No.2所示的DNA序列編碼。實驗數據證實了本發明所述的試劑盒在肝癌術后預后評估方面的有效性并驗證了基于miR?653的所述增敏劑能有效增強肝癌細胞對化療藥物sorafenib的敏感性。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，具體涉及一種肝癌術后預后評估試劑盒和肝癌化療增敏劑。

背景技術

肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC，以下簡稱肝癌)是一種嚴重威脅我國人民生命與健康的惡性腫瘤性疾病。在世界范圍內，肝癌已經成為第三大癌癥相關死亡原因。近年以來，與肝癌相關的影像學診斷技術和外科手術技術不斷提高。以sorafenib為代表的肝癌靶向治療藥物也獲得了美國食品與藥品管理局的批準。這些成果為肝癌的診斷與治療提供了更多更有效的選擇。但遺憾的是，綜觀當前肝癌臨床治療的現狀，肝癌病人的術后五年生存率并沒有顯著提高。

目前，外科手術仍然是肝癌的首選療法。但由于肝癌發病病程長，起病隱匿，一部分病人在確診時就已經錯過了用手術的方法根治肝癌的最佳時機。術后預后不良的病人不得不繼續采取化學治療的辦法來鞏固療效。而不幸的是，肝癌細胞容易對化療藥物產生耐藥性，抗腫瘤藥物化療藥物本身對機體也可能造成較大的毒副作用，故化學治療的預后至今仍難以令人滿意。如能提高肝癌細胞對化療藥物的敏感程度，就可以減少化療藥物的給藥量而盡量地控制藥物的毒副作用。故提高肝癌細胞對化療藥物的敏感性也就成為肝癌臨床治療的關鍵性難題之一。因此，為了給肝癌的早期預防、術后預后評價和化療增敏提供新的靶點，深入研究肝癌發生發展過程中涉及到的分子機理具有十分重大的意義。

微小RNA(microRNAs，簡稱miRNAs)是一種長度約為20～25個核苷酸的非編碼小RNA。miRNA可以通過誘導mRNA降解或者抑制mRNA翻譯等途徑下調靶蛋白的表達水平。這類非編碼RNA參與了許多生理與病理過程。一些miRNA的表達異常則在包括肝癌在內的一系列腫瘤性疾病的發生發展過程中扮演了重要角色。miRNA在肝癌的早期診斷、預后評估和靶向性治療等領域的特殊意義也正吸引著越來越多學者的關注。miR-653在2006年左右就被鑒定到，但目前尚缺乏對其生物學功能的系統研究，對miR-653與肝癌發生和預后的相互關系的認識亦尚不明確。

迄今為止，尚未存在一種以miR-653為生物標志物的肝癌術后預后評估試劑盒，也沒有以miR-653為有效成分的肝癌化療增敏劑。

發明內容

本發明基于本領域存在的上述缺陷和空白，提供了一種以miR-653為主的肝癌術后預后評估標志物，以及一種以miR-653為有效成分的肝癌化療增敏劑。

本發明的技術方案如下：

用于肝癌術后預后評估的試劑盒，其特征在于，包括用于定量檢測待測肝組織中微小RNA分子miR-653表達水平的試劑；所述miR-653的核苷酸序列如Seq ID No.1所示。

所述試劑包括實時定量PCR檢測所述微小RNA分子miR-653所需的檢測引物。

還包括用于對微小RNA分子miR-653進行反轉錄的反轉錄引物,其序列如Seq IDNo.3所示。

所述檢測引物包括上游引物：5’-GTGTTGAAACAATCTCTACTG-3’，和

下游引物：5’-GCGTTCGAACAGCTGCCT-3’。