[發(fā)明專利]一種治療乳腺癌的CAR-T細(xì)胞制劑及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610002321.4
• 申請日: 2016-01-06
• 公開（公告）號: CN105640990A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周萱
• 申請（專利權(quán)）人: 奧思達(dá)干細(xì)胞有限公司
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;A61P35/00;C12N15/867
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種治療乳腺癌的CAR-T細(xì)胞制劑，其特征在于：它是由嵌合了乳腺癌細(xì)胞抗原受體 HCA153-HER2scFv-CD8-OX40-CD3ζ的CAR-T細(xì)胞、人血白蛋白、IL-6受體拮抗藥物，制劑的 優(yōu)選配比為：CAR-T細(xì)胞的濃度為（4～6）×107個/ml，質(zhì)量體積比為2%的人血白蛋白，8mg/ mLIL-6受體拮抗藥物Tocilizumab，余量為生理鹽水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述，CAR-T細(xì)胞的靶細(xì)胞抗原為如下單一抗原或幾個抗原的組合： CA153人表皮生長因子受體-2（HER2）、組織因子（TF）、表皮生長因子受體（EGFG）、血小板衍 生生長因子受體（PDGFR），優(yōu)選HER2和CA153的組合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述，CAR-T細(xì)胞中CAR是HCA153-HER2scFv-CD8-OX40-CD3ζ，CAR的具 體組成為：抗原抗體結(jié)合區(qū)HCA153-HER2scFv、CD8鉸鏈區(qū)、OX40跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)以及CD3ζ胞 內(nèi)信號區(qū)串聯(lián)構(gòu)成。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述，CAR-T細(xì)胞的靶細(xì)胞抗原為CA153-HER2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述，一種治療乳腺癌的CAR-T細(xì)胞制劑的制備方法，主要包括以下 步驟：

（1）載體構(gòu)建：構(gòu)建能夠表達(dá)HCA153-HER2scFv-CD8-OX40-CD3ζ的載體；

（2）轉(zhuǎn)染T細(xì)胞的病毒的包裝：采用步驟（1）中構(gòu)建的載體包裝慢病毒，獲得經(jīng)過包裝的 慢病毒；

（3）T細(xì)胞分離與擴(kuò)增培養(yǎng)：抽取患者自身血液，從中分離出T細(xì)胞并進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)；

（4）T細(xì)胞的轉(zhuǎn)染與制備：采用步驟（2）中經(jīng)過包裝的慢病毒對步驟（3）中培養(yǎng)所得T細(xì) 胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染并擴(kuò)增培養(yǎng)，獲得CAR-T細(xì)胞；

（5）將步驟（4）制備的CAR-T細(xì)胞與人血白蛋白、IL-6受體拮抗藥物Tocilizumab按比例 混勻，余量用生理鹽水補足，制備成CAR-T細(xì)胞制劑。