[發明專利]一種提高大豆分離蛋白水解產物中αα＇亞基的方法

在審

• 申請號: 201610001361.7
• 申請日: 2016-01-05
• 公開（公告）號: CN105594979A
• 公開（公告）日: 2016-05-25
• 發明（設計）人: 黃行健;潘思軼;祝祥威;夏文杰;王魯峰;徐曉云
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: A23J3/34
• 分類號: A23J3/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于食品加工技術領域，具體涉及一種提高大豆分離蛋白水解產物 中αα′亞基含量的方法。

背景技術

大豆是全世界主要的油料作物和人類最經濟的蛋白質來源之一，同時是世 界貿易中重要戰略物質。大豆蛋白作為大豆中的最主要成分，含量達到了 30～50％。大豆蛋白主要由大豆球蛋白(11S)和β-大豆伴球蛋白(7S)組成。 大豆球蛋白是由酸性亞基A和堿性亞基B構成，β-大豆伴球蛋白是由α′、α和β 三個亞基構成的。天然大豆蛋白具有較好的乳化性、凝膠性、持水性、持油性 等功能性質。對大豆蛋白進行改性處理，可以進一步改善其功能特性，從而拓 寬其應用范圍和提高其具體的實用價值。

酶解改性技術經常應用在蛋白質改性領域，酶解改性是利用蛋白酶的外切 或內切作用，將蛋白質降解成多肽、寡肽以及分子量更小的氨基酸的過程。選 擇性酶解技術是從近幾年才開始逐漸興起和趨于成熟的酶解方法，這種技術的 核心在于可以只選擇性地水解掉一部分蛋白亞基，而留下研究者想留下的蛋白 亞基。在大豆蛋白亞基制備方面，目前主要是采用變性劑脲和還原劑β-巰基乙 醇先解聚大豆蛋白，在還原條件下通過DEAE瓊脂糖凝膠F陰離子交換層析 分離純化大豆蛋白亞基，并對制備的亞基進行復性，從而制備出大豆蛋白亞基 的方法。各項研究表明，大豆α′亞基具有顯著降低膽固醇和甘油三酯血漿水平 的功效；同時，α、α′亞基加熱后易形成可溶性聚集體，樣品中α亞基含量越高， 其水溶性和乳化性越好。但是上述應用柱層析分離純化大豆蛋白亞基的方法具 有成本高、時間長、產率低等缺陷。

發明內容

選擇性酶解的方法是21世紀初才開始興起和正在發展完善的方法，該方 法具有成本低、時間短、得率高、安全無污染等優點，而且產品可直接應用于 食品或藥品等領域，故本發明要解決的技術問題是如何克服現有技術的上述缺 陷，提供一種提高大豆蛋白水解產物中αα′亞基含量的方法。

為解決上述技術問題，本提高大豆分離蛋白水解產物中αα’亞基的方法包 括以下工藝步驟：

步驟(1)溶解——將大豆分離蛋白加入到反應容器中，添加蒸餾水，調 整至溶液狀態，調整pH至2.0～2.5，即得大豆分離蛋白溶液；

步驟(2)酶解——對步驟(1)制得的大豆分離蛋白溶液進行酶解處理， 即得大豆分離蛋白酶解液；

步驟(3)分離——步驟(2)酶解完畢后，對步驟(2)制得的大豆分離 蛋白酶解液進行滅酶，將滅酶后的大豆分離蛋白酶解液冷卻至25～28℃，調整 該酶解液的pH值至4.5，離心，收集沉淀，即得大豆分離蛋白水解產物沉淀；

步驟(4)純化——將步驟(3)制得大豆分離蛋白水解產物沉淀添加蒸餾 水復溶，調整pH至6.5～8.0，然后進行冷凍干燥或噴霧干燥，即得。

作為優化方案，以重量份計，步驟(1)所述大豆分離蛋白與蒸餾水添加 量的比例為1∶11.5～99；pH值調整試劑為2mol/L的鹽酸。

作為優化方案，步驟(2)所述酶解處理的具體方法為，以重量份計，將 酶活為3900units/mg的胃蛋白酶與大豆分離蛋白按照2.5∶100的比例配成溶液， 在pH＝2.0～2.5、反應溫度35～40℃的調節下，酶解反應35～45min。

作為優化方案，步驟(3)所述滅酶的具體方法為，將步驟(2)制得的大 豆分離蛋白酶解液的pH值自調整至6.5～8.0，于90～100℃水浴中保溫5～20min； 步驟(3)所述離心步驟的離心力為5000～10000g，離心時間為10～20min。

作為優化方案，以重量份計，步驟(4)所述大豆分離蛋白水解產物沉淀 與蒸餾水添加量按照1∶9～99的比例配成溶液，pH值調整試劑為2mol/L的 NaOH；步驟(4)所述冷凍干燥條件為，物料的厚度為45mm、預凍溫度為-45℃、 預凍時間為2h、凍干溫度為-25℃、凍干時間為24h、解吸溫度為35℃、解吸 時間為10h；步驟(4)所述噴霧干燥條件為，氣體壓力為0.1MPa、進風溫度 為180℃、出風溫度為70℃。

上述大豆分離蛋白為山東臨邑禹王植物蛋白有限公司購得，蛋白質含量為 89.8％，氮溶解指數為66.1％；胃蛋白酶為美國SIGMA公司，酶活為 3900units/mg。

本提高大豆分離蛋白水解產物中αα'亞基的方法與現有技術相比有以下優 點和有益效果：