[發明專利]蒲葵提取物單體、其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201610001351.3
• 申請日: 2016-01-05
• 公開（公告）號: CN105566264A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 明平紅;唐發清;寧勇;陳紅波;蔡婷
• 申請（專利權）人: 珠海市人民醫院
• 主分類號: C07D307/80
• 分類號: C07D307/80;A61K31/343;A61P35/00
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 王賢義;何承鑫

技術領域

本發明涉及生物工程領域，尤其涉及一種蒲葵提取物單體、其制備方法以及其應 用。

背景技術

蒲葵，屬于棕櫚科蒲葵屬，拉丁名為Livistonachinensis，喜溫暖、濕潤、向陽的 環境，分布在熱帶、亞熱帶地區，常用來綠化，此外，蒲葵還具有藥用價值。

蒲葵是一種多年生常綠高大的喬木，形態特征如下：單干，高5-20米，直徑20-30厘 米，根部常膨大。葉闊呈腎狀扇形，其直徑1米余，掌狀深裂至中部，裂片條狀且披針形；葉柄 長1-2米，下部兩側有溝刺。花序呈圓錐狀，長約1米，分支多而疏散；花萼裂至近基部成近尖 狀裂片，裂片有寬的干膜質的邊緣；子房上面有深雕紋，花柱突變成鉆狀；果實黑褐色呈橢 圓形，長1.4-2.2厘米，直徑1-1.2厘米；種子橢圓形，長1.5厘米，直徑0.9厘米。

在中醫臨床上，蒲葵根具有止痛作用，蒲葵葉具有收斂止血止汗作用，蒲葵子具有 止痛及敗毒抗癌、消淤止血之功效。民間常用其治療白血病、鼻咽癌、絨毛膜癌、食道癌[陳 艷,林新華,李少光,翁繩美,姚宏.蒲葵子的體外抗癌活性.福建醫科大學學報[J],2008,2: 93-95.；曾春暉楊柯鄭作文.蒲葵子的含藥血清體外抗腫瘤作用的實驗研究.廣西中醫藥 [J],2007,30(1):58-59.]。但尚無其它臨床應用的報道。

宮頸癌是一種在女性癌癥患者中僅次于乳腺癌和大腸癌的惡性腫瘤，在發展中國 家是第二常見的惡性腫瘤，僅次于乳腺癌。宮頸癌的具體發病機制尚不清楚，主要與病毒感 染、基因突變、端粒酶活性、激素異常、營養不良、免疫功能異常等諸多因素有關。目前，宮頸 癌的治療方案主要包括手術切除和放射療法。化療是一個重要的治療手段，特別適用于晚 期和轉移性的治療。但在化療的過程中，一些癌細胞可出現不同程度的耐藥性現象。此外， 大多數化療藥物的毒性大，化療后大多數患者出現很多不良反應，所有這些使化療藥物應 用受到一定限制。因此，尋找一種新的有效且低毒的化療藥物具有重要意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，旨在提供一種蒲葵提取物單 體及其制備方法和應用。

本發明所述蒲葵提取物單體所采用的技術方案是，該單體的結構如下：

本發明上述蒲葵提取物單體的制備方法所采用的技術方案是：該方法用有機溶劑提取 并經過硅膠柱和HPLC分離得到蒲葵提取物單體。

一個優選的方案是，上述方法的具體步驟為：

（1）將蒲葵原料洗凈，烘干，粉碎至20-100目，得到干粉；

（2）取步驟（1）得到的干粉，加入70%的乙醇水溶液，室溫條件下靜置浸提24小時并循環 回流，其中加入的干粉和乙醇水溶液的質量/體積比為w/v=1:20；

（3）將步驟（2）得到的全部液體在50℃的真空下將有機溶劑蒸發，得到棕色漿狀粗提取 物，該粗提取物懸浮于水，用氯仿萃取，將上述提取物過200-300目硅膠柱，用氯仿-甲醇溶 液洗脫硅膠柱上的成分，用HPLC純化分離即得到蒲葵提取物單體。

進一步優選的方案是，所述蒲葵原料為蒲葵的種子、根或葉。

由上述方法制備得到的蒲葵提取物單體在抑制宮頸癌細胞中的應用。

所述應用為如下的至少一種：

（1）抑制宮頸癌細胞的增殖和/或生長；

（2）抑制宮頸癌細胞的克隆形成；

（3）促進宮頸癌細胞凋亡；

（4）降低宮頸癌細胞線粒體膜電位并使膜完整性受損；

（5）將宮頸癌細胞的細胞周期抑制在G1/S期；

（6）上調G1/S期的細胞周期蛋白CyclinA2和細胞周期依賴性激酶CDK2蛋白的表達水 平，同時升高P21蛋白的表達水平；

（7）裸鼠體內亦可抑制宮頸癌細胞增殖和/或生長；

（8）治療宮頸癌。