[發明專利]抗CD89細胞毒素的復合物

在審

• 申請號: 201580078199.2
• 申請日: 2015-03-25
• 公開（公告）號: CN107428840A
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 克利斯多夫·斯坦;拉多斯拉夫·姆拉德諾夫;伯哈德·斯托克邁爾;斯蒂芬·巴斯;萊亞·克里斯廷·海因;瑞納爾·費希爾
• 申請（專利權）人: 弗勞恩霍夫應用研究促進協會;亞琛工業大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K16/28;A61K38/16;A61K47/68;A61P35/00;A61P35/02;A61P29/00;A61P19/02;A61P11/00;A61P11/06;A61P17/00;A61P17/06;A61P37/02
• 代理公司: 北京三高永信知識產權代理有限責任公司11138
• 代理人: 閆小剛

技術領域

本文提供的技術涉及適于靶向和殺死人靶細胞的新型復合物，所述復合物包含具有結合結構的第一多肽和具有毒性效應結構域的第二多肽，所述結合結構用于將所述復合物與存在于人靶細胞的細胞表面的細胞表面受體CD89相結合；還涉及編碼所述復合物的核酸分子、載體、含有核酸的宿主細胞和用于制備和產生此類復合物的方法；以及使用所述復合物用于治療疾病，特別是如白血病等癌癥的組合物和方法。

背景技術

在治療腫瘤、自身免疫性疾病、過敏和組織排斥反應方面，目前可用的藥物，如化療劑(Goodin,S.,Am J Health Syst Pharm,2007,64:p.15-24)皮質類固醇(Stanbury,R.M.&Graham,E.M.,Br J Ophthalmol,1998,82:p.704-708)和免疫抑制劑等(Stucker,F.&Ackermann,D.,Ther Umsch,2011,68:p.679-686)，由于其相關的非特異性，缺點在于具有潛在的有時相當大的副作用。已經嘗試通過各種治療方案來改善這種情況。特別是使用免疫治療劑這種方法，其增加了特別是在腫瘤治療方面的藥物的特異性。

免疫毒素(IT)是最初開發用于治療惡性疾病的蛋白。它們包含毒性效應結構域和腫瘤細胞特異性結合組分，其通常是抗體或其衍生物。最初，抗體組分來自小鼠，而毒素來自細菌或植物，例如，銅綠假單胞菌外毒素A(ETA)(Ribbert,T.,et al.,Br J Dermatol,2010；163:p.279-86)、白喉毒素(DT)(Potala,S.,et al.,Drug discovery today,2008,13:p.807-15)或蓖麻A毒素(RT)(Thepen T.,et al.,Nature biotechnology,2000,18:p.48-51.)。與傳統化療相比，IT的主要優勢在于其具有針對靶細胞的特有的特異性。

由與人毒性效應結構域(如促細胞凋亡酶)融合的疾病特異性結合組分(如scFV、細胞因子或肽配體)構成的融合蛋白被稱為“人溶細胞融合蛋白”(hCFP)，并已經在幾個應用中證明了它們的潛力(Stahnke,B.,et al.,Mol Cancer Ther,2008.7(9):p.2924-32；Huhn,M.,et al.,Cancer Res,2001.61(24):p.8737-42；Krauss,J.,et al.,Br J Haematol,2005.128(5):p.602-9；Schiffer,S.,et al.,Antibodies,2013.2(1):p.9-18；Hristodorov,D.,et al.,Br J Cancer,2014.109(6):p.1570-1578)。

在臨床使用中大多數抗癌藥物的治療活性受到其對增殖細胞(包括一些正常細胞)的一般毒性的限制。雖然化學家持續開發具有獨特作用機制的新型細胞毒劑，但是許多這些化合物仍然缺乏腫瘤選擇性，不具有治療用途。抗體或其切除片段也意味著IT和hCFP與癌細胞表面的特異性標記結合，其提供了一種對腫瘤具有高度特異性因此具有更低毒性的取代療法(Chari,RV,Accounts of chemical research,2008,41:p.98-107)。

然而，為了獲得期望的IT和/或hCFP的細胞毒性作用，靶細胞中的一些處理步驟至關重要。在IT-或hCFP-抗原復合物進行必要的結合和內化之后，隨后的細胞內途徑和胞質遞送是對活性的關鍵影響(Berges,N.,et al.Antibodies,2014,3(1):p.92-115)。

一個例子是使用免疫療法治療白血病，其需要在原始細胞表面上靶向特異性抗原。已經對Fcγ受體(FcvRI，CD64)進行了詳細研究。CD64靶向免疫療法已經在急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML)細胞的靶向消融中顯示出所希望的功效。到目前為止，CD64是唯一被認為適合作為致癌和炎性疾病的免疫治療的靶標的Fc受體。然而，許多缺乏CD64表達的惡性腫瘤的臨床病例(Schiffer,S.,et al.,Int J Cancer,2014,135:p.1497-508))排除了進行有效CD64靶向治療的可能性。

此外，IT或hCFP的細胞毒性功效關鍵依賴于在IT-或hCFP-抗原復合物內化之后所使用的scFv和隨后的細胞內途徑。因此，所選擇的scFv以及所述毒性效應結構域，需要滿足多個要求以獲得IT或CFP細胞毒性。