[發(fā)明專利]細胞分泌特征的分析和篩選

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580075327.8
• 申請日: 2015-12-03
• 公開（公告）號: CN107407638B
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發(fā)明（設計）人: P.帕茨科夫斯基;S.麥凱;S.麥庫斯克
• 申請（專利權）人: 伊索普萊西斯公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/543;B01L3/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;黃希貴

實施方案公開了用于進行生物篩選和分析的裝置、方法和軟件，其使用能夠檢測多種基于細胞的分泌物、表達蛋白和其他細胞組分的儀器平臺實施。可將所述平臺配置為用于同時多路檢測多個生物組分，由此可對大量的離散樣品進行獨立分離和評價，以高度平行且可擴展的方式檢測或鑒定來自所述樣品的組分。

相關申請的交叉引用

本申請要求2014年12月3日提交的標題為“用于針對單細胞功能和多功能特征篩選免疫細胞的方法和系統(tǒng)”的美國臨時專利申請系列號62/087,147 (代理人案號IPX-0200PRO)的權益，所述申請通過引用以其整體結合到本文中。

本公開內容的領域

本發(fā)明一般涉及細胞分析，以及更具體而言涉及用于細胞狀態(tài)的生化評價和功能表征的裝置、方法和軟件。

發(fā)明背景

在包括細胞生物學和免疫學在內的領域，開發(fā)用于評價和定量細胞蛋白質表達和分泌特征的分析技術，對于闡明根本的生化過程和細胞信號轉導機制而言非常重要。部分地因細胞常常表現(xiàn)出不同的行為所致，存在對這樣的工具和程序的需求，其能夠分析大量離散的細胞群體，亦適于在單細胞水平檢測生物分子。細胞表型和功能性的靈敏而準確的評價，以及驅動子和單個細胞之間的相互作用的鑒定，已顯示為生物系統(tǒng)的能力和運行的重要標志。

例如，免疫細胞反應通過大量分泌蛋白來引導，包括細胞因子、趨化因子和生長因子，其代表介導一系列細胞行為和細胞-細胞信號轉導過程的重要功能調節(jié)子。監(jiān)測這些復雜的免疫-信號轉導途徑和細胞相互作用，對于鑒定可用于了解免疫系統(tǒng)狀態(tài)、預測臨床結果和指導治療或療法的臨床上相關的測量，顯示出重大挑戰(zhàn)。對用于細胞分析的靈敏且高度多路操作的技術存在日益增多的需求，其可用于鑒定并快速評價疾病的相關物、對各種化學物質和治療劑的細胞反應以及涉及免疫干預的其他基于細胞的過程。所述技術亦可用于更好地理解免疫的根本機制。

本公開內容概述

本公開內容提供對于確定和研究細胞過程及功能特征而言有用的裝置、方法和軟件。在多個實施方案中，可在免疫細胞的細胞分析的情況下有利地應用本教導。例如，可在單細胞水平評價對各種療法的T細胞功能性及相關反應、化學相互作用和/或疾病狀態(tài)。

在多個實施方案中，公開了用于進行生物篩選和分析的裝置、方法和軟件，其使用能夠檢測多種基于細胞的分泌物、表達蛋白和其他細胞組分的儀器平臺實施。可將所述平臺配置為用于同時多路檢測多個生物組分，由此可對大量的離散樣品進行獨立分離和評價，以高度平行且可擴展的方式檢測或鑒定來自所述樣品的組分。在多個實施方案中，將所述平臺配置為用于自動或半自動處理，顯著改進效率(time-to-result)、樣品通量、檢測準確性和靈敏性。

所述平臺可有利地適用于分析少量細胞和單細胞。如在本文中所公開的，單細胞及單細胞之間的細胞相互作用(例如細胞-細胞相互作用)的分析在免疫學應用中特別有用，以幫助確定免疫細胞，例如B細胞、T細胞(例如CD4+、CD8+細胞)和/或巨噬細胞的功能特征。盡管提供和論述了涉及免疫細胞的多個實例和工作流，但要理解的是，本教導的裝置、方法和軟件可適于與多種不同的細胞類型一起使用。此外，所述樣品分析技術可延伸到細胞或生物分析應用之外，用于其中需要基本上同時評價多個離散樣品的多種不同分析物的其他化學測定。此外，可平行地評價除細胞之外的樣品組分，例如含目標化學物質、化合物或其他分析物的珠粒或其他顆粒。在多個實施方案中，本文所公開的技術靈敏性足以檢測、區(qū)分和定量以非常小的液體體積或水體積(例如，納升和皮升體積或更小體積)存在的多個分析物。