[發(fā)明專利]具有增強(qiáng)的神經(jīng)結(jié)合選擇性的環(huán)狀肽、與所述環(huán)狀肽結(jié)合的納米顆粒和此二者用于實(shí)時體內(nèi)神經(jīng)組織成像的用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580074726.2
• 申請日: 2015-12-15
• 公開（公告）號: CN107249647A
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 米歇爾·S·布拉德伯里;巴內(nèi)·游;烏爾里希·維斯納;陳培明;馬凱;斯尼哈爾·G·帕特爾;達(dá)尼埃拉·卡拉薩瓦·扎諾尼
• 申請（專利權(quán)）人: 紀(jì)念斯隆-凱特琳癌癥中心;康奈爾大學(xué)
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61B5/00;A61K9/00
• 代理公司: 北京律盟知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11287
• 代理人: 沈錦華

相關(guān)申請案交叉參考

本申請案主張2014年12月15日提出申請的美國臨時申請案第62/092,191號的權(quán)益，所述文件的全部內(nèi)容以引用方式并入本文中。

政府支持

本發(fā)明是在政府支持下在國家衛(wèi)生研究院(National Institute of Health)所授予的許可號NIH NCI U54 CA199081-01下作出。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明大體來說涉及環(huán)狀肽與環(huán)狀肽結(jié)合的納米顆粒和使用所述環(huán)狀肽和/或所述與環(huán)狀肽結(jié)合的納米顆粒進(jìn)行手術(shù)中神經(jīng)組織成像的方法。

背景技術(shù)

許多手術(shù)程序攜帶意外神經(jīng)損害或橫斷的風(fēng)險，此可產(chǎn)生大量問題(例如慢性疼痛或癱瘓)。已研究在手術(shù)期間使用近紅外(NIR)藥劑來突出顯示神經(jīng)組織，由此增強(qiáng)外科醫(yī)生避免切割或損害所突出顯示神經(jīng)組織的能力。舉例來說，已使用諸如二苯乙烯基苯和噁嗪等分子，但其缺乏有效用于人類和其它哺乳動物中的手術(shù)中應(yīng)用所需的結(jié)合特性和/或光譜性質(zhì)。

惠特尼(Whitney)等人通過將噬菌體展示方法應(yīng)用于切下的鼠類周邊神經(jīng)而鑒別出若干神經(jīng)結(jié)合多肽(惠特尼M.A.；克里斯普J(rèn).L.(Crisp,J.L.)；阮L.T.(Nguyen,L.T.)；弗里德曼B.(Friedman,B.)；格羅斯L.A.(Gross,L.A.)；斯坦巴克P.(Steinbach,P.)；錢R.Y.(Tsien,R.Y.)；阮Q.T.自然生物技術(shù)(Nat.Biotech.)2011,29,352)。隨后使用熒光團(tuán)或NIR染料標(biāo)記序列，且在體外和在體內(nèi)評估結(jié)合。較背景提供最高對比的序列為17殘基多肽NP41(圖1A)。需要對神經(jīng)組織具有增強(qiáng)的選擇性且對于手術(shù)中應(yīng)用具有改良光譜性質(zhì)的神經(jīng)結(jié)合劑。

發(fā)明內(nèi)容

本文描述環(huán)狀肽、與環(huán)狀肽結(jié)合的納米顆粒和使用所述環(huán)狀肽和/或所述與環(huán)狀肽結(jié)合的納米顆粒進(jìn)行手術(shù)中神經(jīng)組織成像的方法。

在一個方面中，本發(fā)明涉及一種神經(jīng)結(jié)合肽偶聯(lián)物，其包括：環(huán)狀肽、納米顆粒、熒光劑和連接體部分。在另一方面中，本發(fā)明涉及一種神經(jīng)結(jié)合肽偶聯(lián)物，其包括：線性多肽、納米顆粒、熒光劑和連接體部分。

在某些實(shí)施例(任一方面)中，納米顆粒包括：基于二氧化硅的核心；位于核心內(nèi)的熒光劑；環(huán)繞核心的至少一部分的二氧化硅殼體；附接到納米顆粒的連接體部分；和任選地1到20個附接到經(jīng)聚合物涂覆的納米顆粒的肽配體。

在某些實(shí)施例(任一方面)中，納米顆粒為超小顆粒(舉例來說，平均直徑小于100nm、例如小于50nm、例如小于30nm、例如小于20nm、例如小于10nm)(舉例來說，其中超小納米顆粒為C點(diǎn)或C’點(diǎn))。

在某些實(shí)施例(任一方面)中，連接體部分包括一個或多個選自由以下組成的群組的成員：聚乙二醇(PEG)、PEG₂和氨基甲酸對氨基芐基氧基酯(PABC)(舉例來說，其中連接體部分具有2到50個原子)。在某些實(shí)施例中，連接體部分包括一個或多個描述于美國專利申請案第14/722,307號(2015年5月27日提出申請，公開為美國專利申請公開案第US 2015/0343091號，所述文件的全部內(nèi)容以引用方式并入本文中)的連接體部分。

在某些實(shí)施例中，環(huán)狀肽通過連接體部分結(jié)合到納米顆粒。在某些實(shí)施例(任一方面)中，熒光劑包括青色素染料(例如Cy5或Cy5.5)。在某些實(shí)施例(任一方面)中，神經(jīng)結(jié)合肽偶聯(lián)物具有5到20個氨基酸殘基和/或15原子到60原子大環(huán)。在某些實(shí)施例(任一方面)中，神經(jīng)結(jié)合肽偶聯(lián)物具有17個氨基酸殘基和/或51原子大環(huán)。

在某些實(shí)施例中，環(huán)狀肽包括肽序列NTQTLAKAPEHT。在某些實(shí)施例中，大環(huán)是通過頭對尾環(huán)化肽或通過在序列內(nèi)部引入共價鍵來形成。在某些實(shí)施例中，環(huán)狀肽包括選自由以下組成的群組的肽序列：TYTDWLNFWAWP、KSLSRHDHIHHH和DFTKTSPLGIH。

在另一方面中，本發(fā)明涉及包括肽序列NTQTLAKAPEHT的環(huán)狀肽。

在另一方面中，本發(fā)明涉及包括選自由以下組成的群組的肽序列的環(huán)狀肽：TYTDWLNFWAWP、KSLSRHDHIHHH和DFTKTSPLGIH。

在另一方面中，本發(fā)明涉及一種環(huán)狀肽組合物，其包括：熒光劑；和包括肽序列NTQTLAKAPEHT的環(huán)狀肽。