[發明專利]用于GST-PI基因調節的RNA干擾劑

有效

• 申請號: 201580071191.3
• 申請日: 2015-12-28
• 公開（公告）號: CN107106591B
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 應文斌;味吞憲二郎;J·哈波爾斯;高橋博一;寺田繪里加;張雋;M·阿瑪笛安
• 申請（專利權）人: 日東電工株式會社
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 楊宏軍;牛蔚然

本發明提供了使用RNA干擾來調節人GST?pi的表達的化合物、組合物和方法。RNA干擾分子可用于預防或治療諸如惡性腫瘤的疾病的方法。提供了具有一個或更多個經修飾或經化學修飾的核苷酸的一系列siRNA結構。有利的結構包括具有位于種子區域的2’?脫氧核苷酸以及其它核苷酸修飾的siRNA。

技術領域

本發明涉及由基于核酸的分子構成的生物藥物和治療劑領域。更特別地，本發明涉及利用RNA干擾(RNAi)來調節人GST-π的表達的化合物和組合物及其用途。

序列表

本申請包括于2015年12月20日創建的命名為ND5123385WO_SL.txt的作為ASCII文件以電子方式提交的序列表，其大小為100,000字節，該序列表通過引用整體并入本文。

發明背景

已經發現各種人類癌組織與突變的KRAS基因的出現相關。在一些情況下，所述組織也呈現出升高水平的谷胱甘肽S-轉移酶Pi(GST-π)表達。(Miyanishi等，Gastroenterology，2001，第121卷：865-874，摘要)。例如，在各種胃腸道惡性腫瘤患者中觀察到升高的血清GST-π水平。(Niitsu等，Cancer，1989，第63卷，No.2，第317-323頁，摘要)

GST-π是通過催化疏水性和親電子化合物與還原型谷胱甘肽的綴合而在解毒中起作用的酶的GST家族的成員。使用siRNA可以在體外減少GST-π表達。(Niitsu等，US 2014/0315975A1)。然而，現有siRNA劑存在許多缺點，例如活性不足、脫靶效應(off targeteffects)、缺乏血清穩定性以及缺乏體內功效或效力。

迫切需要用于調節與癌癥相關的基因的表達的組合物和方法。特別地，基于GST-π表達抑制的治療劑將需要高功效和穩定的siRNA序列和結構，其可降低脫靶效應。

人們需要用于調節GST-π表達的siRNA序列、化合物和結構，其具有治療疾病(例如，惡性腫瘤)的用途。

發明內容

本發明涉及使用RNA干擾來調節人GST-π表達的化合物、組合物和方法。

在一些實施方案中，本發明提供了用于對GST-π進行RNA干擾基因沉默的分子。

在另一些實施方案中，本發明的結構、分子和組合物可用于預防或治療與GST-π相關的疾病或改善與GST-π相關的病癥或障礙(包括惡性腫瘤)的癥狀的方法。

本發明的實施方案包括以下內容：

一種核酸分子，其用于抑制GST-π的表達，所述核酸分子包含有義鏈和反義鏈，其中所述的鏈形成雙鏈體區域。所述核酸分子可以是用于抑制GST-π表達的siRNA分子，并且可含有經修飾或經化學修飾的一個或更多個核苷酸。

在一些實施方案中，用于抑制GST-π表達的核酸siRNA分子可包括2'-脫氧核苷酸、2'-O-烷基取代的核苷酸、2'-脫氧-2'-氟取代的核苷酸或其任意組合。在某些實施方案中，2'-脫氧核苷酸可以在siRNA分子的種子區域。在某些方面，用于抑制GST-π表達的siRNA分子可在反義鏈的多個位置處具有脫氧核苷酸。

本發明的核酸分子可以以小于300pM的IC50有利地抑制GST-πmRNA的表達。在某些實施方案中，單次施用所述分子后，所述核酸分子可在體內抑制至少25％的GST-πmRNA表達水平。在一些實施方案中，所述核酸分子可具有脫靶活性降低、或降低至少50倍或至少100倍的乘客鏈。

本發明的實施方案提供了藥物組合物，其包含siRNA分子和可藥用運載體。在一些實施方案中，所述運載體可以是脂質分子或脂質體。本發明包括包含核酸分子的載體或細胞。