[發明專利]從粗溶液捕獲靶分子

有效

• 申請號: 201580068455.X
• 申請日: 2015-11-18
• 公開（公告）號: CN107001411B
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: R.施庫達斯;K.阿德里安;B.埃德爾曼;M.約恩克
• 申請（專利權）人: 默克專利股份公司
• 主分類號: C07K1/20
• 分類號: C07K1/20;B01D15/32
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;萬雪松

1.從含有靶肽的溶液分離肽聚集體和片段的方法，包括以下步驟

（a）提供含有靶肽的樣品；

（b）使所述樣品與疏水層析材料接觸適當的時間段并吸附肽，所述疏水層析材料由聚苯乙烯或聚乙基苯乙烯組成，所述聚苯乙烯或聚乙基苯乙烯以98:2至最高10:90重量％的比例與二乙烯基苯和乙二醇二甲基丙烯酸酯的共聚物交聯，

（c）通過使用不同的溶劑組合物回收靶肽，并

從而使聚集的肽和肽片段與靶肽分離。

2.權利要求1所述的方法，其中所述疏水層析材料具有的平均粒徑在10 μm-600 μm的范圍內。

3.權利要求1所述的方法，其中所述疏水層析材料具有的平均粒徑在20 μm-150 μm的范圍內。

4.權利要求1所述的方法，其中所述疏水層析材料具有的平均粒徑在20 μm-63 μm的范圍內。

5.權利要求1所述的方法，其中所述疏水層析材料由疏水多孔聚合物珠組成，所述疏水多孔聚合物珠具有的孔徑在4-500 nm的范圍內。

6.權利要求1所述的方法，其中所述疏水層析材料由疏水多孔聚合物珠組成，所述疏水多孔聚合物珠具有的孔徑在10-30 nm的范圍內。

7.權利要求1所述的方法，其中所述疏水層析材料由疏水多孔聚合物珠組成，所述疏水多孔聚合物珠具有的孔徑在13 nm-25 nm的范圍內。

8.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在步驟b）中，將含有靶肽的水溶液與疏水層析材料接觸，所述含有靶肽的水溶液具有在2-11范圍內的pH值和在1-150 mS/cm范圍內的導電性。

9.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在步驟b）中，將含有靶肽的水溶液與疏水層析材料接觸，所述含有靶肽的水溶液具有在3-8范圍內的pH值和在2-50 mS/cm范圍內的導電性。

10.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在步驟b）中，將所述疏水層析材料以在150-1000 cm/分鐘范圍內的流速暴露于每ml填充床中30-100 mg靶肽。

11.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在步驟b）中，將所述疏水層析材料以在300-900 cm/分鐘范圍內的流速暴露于每ml填充床中50-80 mg靶肽。

12.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在步驟c）中，所述疏水層析材料以直接或梯度的方式暴露于含有機溶劑的水溶液中，由此依賴于含有的有機溶劑濃度，實現了聚集的肽和靶肽之間的部分分離。

13.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在步驟c）中，使用包含在水性混合物中的各種比例的有機溶劑實現結合的組分的選擇性解吸和分離。

14.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在靶分子重折疊步驟之后進行肽聚集體的分離。

15.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中在將樣品與疏水層析材料接觸適當的時間段并吸附肽之后，將加樣的層析材料加到肽重折疊后溶液，以選擇性降低聚集的物質的水平合適的時間段。

16.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述使聚集的肽和肽片段與靶肽分離包括用離子交換樹脂處理。

17.權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述分離以結合和洗脫或流通模式進行，由此將流速調節到150 cm/分鐘-1000 cm/分鐘的范圍內。