[發(fā)明專利]用于俘獲核酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580067328.8
• 申請日: 2015-12-02
• 公開（公告）號: CN107002147B
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: J.R.內(nèi)爾森;B.李
• 申請（專利權(quán)）人: 環(huán)球生命科學(xué)解決方案運營英國有限公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12Q1/6816;C12N15/10;G01N33/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;周李軍

1.一種俘獲靶核酸的方法，所述方法包括：

將核酸俘獲探針施加至基質(zhì)的俘獲區(qū)，其中具有第一分子量的核酸俘獲探針至少包含與靶核酸序列的至少一部分互補的序列，且核酸俘獲探針固定在基質(zhì)的俘獲區(qū)上；

將包含具有小于核酸俘獲探針的第二分子量的靶核酸的樣品施加至基質(zhì)的樣品施加區(qū)；其中包含靶核酸的樣品通過側(cè)向流動流經(jīng)從樣品施加區(qū)至俘獲區(qū)的一段基質(zhì)，靶核酸在俘獲區(qū)通過雜交被核酸俘獲探針俘獲；

其中所述核酸俘獲探針是滾環(huán)擴增(RCA)產(chǎn)物，

其中所述核酸俘獲探針的分子量足夠高以通過與基質(zhì)纏結(jié)使其固定在基質(zhì)上，

其中所述核酸俘獲探針的第一分子量的范圍為20,000個堿基-150,000個堿基。

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述核酸俘獲探針包含多個串聯(lián)重復(fù)序列。

3.權(quán)利要求2的方法，其中每個串聯(lián)重復(fù)序列包含20-150個核苷酸。

4.權(quán)利要求1的方法，其中所述核酸俘獲探針包含單鏈核酸。

5.權(quán)利要求1的方法，其中所述核酸俘獲探針包含脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、肽核酸(PNA)、鎖定核酸(LNA)或其組合。

6.權(quán)利要求1的方法，其中所述樣品施加區(qū)和俘獲區(qū)相同。

7.權(quán)利要求1的方法，所述方法進一步包括使樣品與裂解試劑接觸。

8.權(quán)利要求1的方法，其中所述樣品包含裂解試劑。

9.權(quán)利要求7的方法，其中將所述裂解試劑浸入樣品施加區(qū)。

10.權(quán)利要求1的方法，其中樣品施加區(qū)還包含遷移調(diào)節(jié)劑。

11.權(quán)利要求10的方法，其中所述遷移調(diào)節(jié)劑包含離液劑。

12.權(quán)利要求10的方法，其中所述遷移調(diào)節(jié)劑包含硫氰酸胍。

13.權(quán)利要求1的方法，其中所述樣品還包含具有第三分子量的模板核酸，且液體是擴增模板核酸形成靶核酸擴增產(chǎn)物的核酸擴增反應(yīng)混合物。

14.權(quán)利要求13的方法，其中一個或多個擴增反應(yīng)在樣品施加區(qū)或在靶核酸擴增產(chǎn)物遷移期間發(fā)生。

15.權(quán)利要求1的方法，所述方法進一步包括洗滌基質(zhì)以除去存在于基質(zhì)上的一種或多種抑制劑、非靶核酸、裂解試劑或其組合。

16.權(quán)利要求1的方法，其中將一級檢測探針加入靶核酸、核酸俘獲探針或其組合中。

17.權(quán)利要求1的方法，其中靶核酸、核酸俘獲探針的一種或多種包含一級檢測探針。

18.權(quán)利要求17的方法，其中所述一級檢測探針包含生色團部分、熒光部分、磷光部分、親和探針、磁性探針或金屬探針。

19.權(quán)利要求17的方法，其中所述一級檢測探針包含順磁性探針。

20.權(quán)利要求17的方法，其中所述一級檢測探針包含選自抗體、生物素、鏈霉抗生物素珠粒或金顆粒的結(jié)合部分。

21.權(quán)利要求17的方法，所述方法進一步包括：使包含二級檢測探針的溶液沿所述一段基質(zhì)流動以與一級檢測探針、靶核酸、核酸俘獲探針或其組合結(jié)合。

22.權(quán)利要求1的方法，其中所述基質(zhì)是包含第一末端、樣品施加區(qū)、第二末端和俘獲區(qū)的長形條帶。