[發明專利]具有聚合物接枝的多孔薄膜、其方法及用途

有效

• 申請號: 201580062989.1
• 申請日: 2015-11-18
• 公開（公告）號: CN107003306B
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發明（設計）人: B.李;B.C.巴勒斯;D.R.莫雷;J.M.尼喬斯;C.E.奧森;W.C.阿伯特斯;F.J.蒙德洛
• 申請（專利權）人: 通用電氣公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 徐晶;周李軍

本文描述一種包含接枝到多孔薄膜的聚合物涂層的經改性多孔薄膜。本發明也用經改性薄膜提供一種用免疫檢驗從生物樣品檢測分析物的方法，其中所述方法包括a)提供具有式(I)結構的經改性多孔薄膜；b)用第一生物分子培養經改性多孔薄膜，其中第一生物分子結合到經改性多孔薄膜，以形成第一生物分子結合的經改性多孔薄膜；和c)將包含至少一種分析物的生物樣品加到第一生物分子結合的經改性多孔薄膜，用于通過結合分析物到結合到經改性多孔薄膜的第一生物分子檢測分析物。

相關申請交叉引用

本申請涉及與本文同時提交的標題為“Porous Membranes with a PolymerGrafting, Methods and Uses Thereof”(具有聚合物接枝的多孔薄膜、其方法及用途)的美國專利申請14/548,383，其全部公開內容通過引用結合到本文中。

發明領域

本發明一般涉及用聚合物涂層接枝以促進生物分子固定到多孔薄膜上的多孔薄膜。本文也描述制備和使用具有這些聚合物涂層的經改性多孔薄膜的方法。

背景

多孔薄膜，例如硝化纖維素薄膜，常規用于多種過程，包括需要固定一種或多種生物分子的生物應用。這些生物分子包括但不限于蛋白質(例如，抗體)和核酸(例如，脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA))。需要薄膜用于固定生物分子，用于例如免疫檢驗、體外診斷試驗(具體地講，定點護理診斷方法)和分離多種生物過程和醫療技術的生物樣品(例如，血尿、唾液、痰、其它身體分泌物和組織樣品)中的分析物或生物分子。

硝化纖維素薄膜顯示硝化纖維素薄膜和一種或多種生物分子之間的實質非特異相互作用，且研究者傳統上依賴這種被動結合作為基礎在多種“捕集”型固定方法中使用硝化纖維素薄膜。然而，為了在很多生物應用中成功使用硝化纖維素薄膜，對硝化纖維素薄膜和關注的生物分子之間這種被動相互作用的依賴可導致復雜性，因為必然限制可能固定在硝化纖維素薄膜上的生物分子的量。對這種被動結合過程的依賴足夠用于其中在待分析的生物樣品中存在足夠高濃度的分析物或生物分子的某些應用。然而，這種被動結合過程限制基于傳統硝化纖維素薄膜的技術，例如，在其中分析物或生物分子量低且由已知組合物和標準方法可能“不可檢測”的病癥中。硝化纖維素薄膜和關注的生物分子之間的被動相互作用可進一步導致在使用期間在基于流的檢驗(例如，側流檢驗)中生物分子從硝化纖維素薄膜的一定程度分離。在液體流動通過薄膜用于洗滌、洗脫或檢測時，生物分子可能分離。這造成由生物分子結合分析物的靈敏度損失，并增加成本，因為在結合檢驗中需要使用更多生物分子，以在不同應用中解釋生物分子分離。

以前研究已用不同技術來改性多孔薄膜，例如硝化纖維素薄膜，以改善生物分子結合或固定在多孔薄膜基材上。促進生物分子結合到多孔薄膜的方法包括但不限于氨等離子體處理、氧等離子體處理、“橋連”分子共價結合和硝化纖維素薄膜羥胺處理。這些技術和薄膜改性未達到本領域技術人員希望的目標。

因此，在本領域需要能夠較好固定和結合生物分子的基材和使基材(例如多孔薄膜)改性(例如，化學改性)以改善固定和結合關注的生物分子(例如，蛋白質和核酸)的方法。

概述

在一個實施方案中，本發明提供一種用免疫檢驗從生物樣品檢測分析物的方法，其中所述方法包括a)提供具有式(I)結構的經改性多孔薄膜，其中式(I)為：