[發明專利]使用間接ELISA測量包含人FC的蛋白質滴度的試劑盒及用其測量含人FC的蛋白質滴度的方法有效
| 申請號： | 201580058076.2 | 申請日： | 2015-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN107110870B | 公開（公告）日： | 2019-06-28 |
| 發明（設計）人： | 辛庸源;李柱浩;林正愛;張基奐;金敏洙 | 申請（專利權）人： | 株式會社綠十字 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京志霖恒遠知識產權代理事務所(普通合伙) 11435 | 代理人： | 陳姍姍;郭棟梁 |
| 地址： | 韓國*** | 國省代碼： | 韓國;KR |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 使用 間接 elisa 測量 包含 fc 蛋白質 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于測量包含人Fc的蛋白質滴度的試劑盒，包括：
(a)樣品用稀釋劑，包括5～100％(w/v)的牛血清、0.05～0.2％(w/v)的脫脂牛奶、0.025～0.1％(w/v)的非離子型表面活性劑和0.025～0.1％(w/v)的防腐劑；
(b)綴合物用稀釋劑，包括10％(w/v)的山羊血清血清；以及
(c)洗滌液，包含10～40mM的醋酸鈉、75～300mM的氯化鈉以及0.025～0.1％(w/v)的非離子型表面活性劑。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其中，所述防腐劑為Proclin 300。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其中，所述山羊血清包括山羊抗人IgG。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，其中，所述山羊抗人IgG對人Fc具有特異性。
5.根據權利要求1所述的試劑盒，其中，所述包括人Fc的蛋白質是選自以下組成的組中的一種或多種：人抗體、人源化抗體以及含有人Fc的融合蛋白。
6.根據權利要求1所述的試劑盒，其中，所述洗滌液的pH為3～5。
7.一種使用權利要求1～6的任一項所述的試劑盒測量包含人Fc的蛋白質的滴度的方法，所述方法包括：
(a)通過使用樣品用稀釋劑稀釋包括含有人Fc的蛋白質的樣品；
(b)使以各種濃度稀釋的標準溶液與所述樣品用稀釋劑在吸收靶抗原的板的孔中反應；
(c)吸取每個孔的內容物，并用洗滌液洗滌每個孔；
(d)完全除去殘留在每個孔中的所述洗滌液，并在每個要進行反應的孔中加入綴合物用稀釋劑；
(e)吸取每個孔的內容物，并用所述洗滌液洗滌每個孔；
(f)完全除去殘留在每個孔中的所述洗滌液，并在每個要進行反應的孔中加入底物溶液；
(g)通過在每個孔中加入終止反應的溶液而終止反應；以及
(h)測量所述標準溶液和所述樣品的吸光度。
8.根據權利要求7所述的方法，其中，所述包括含有人Fc的蛋白質的樣品為選自以下組成的組中的一種或多種：人血清、人血漿和人類血液。
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