[發明專利]改善木糖利用的鐵-硫簇蛋白中的突變

在審

• 申請號: 201580054986.3
• 申請日: 2015-08-11
• 公開（公告）號: CN108064269A
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: A·弗勒利希;B·漢寧森;S·科瓦拉;R·M·策勒
• 申請（專利權）人: 拉勒曼德匈牙利流動管理有限責任公司
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;C12P7/06
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅;李渤

1.一種重組酵母細胞，其包含(a)至少一種編碼與鐵代謝相關的蛋白的異源基因和/或一種或多種編碼與鐵代謝相關的蛋白的內源基因中的一個或多個突變；和(b)至少一種編碼具有木糖異構酶活性的多肽的異源基因。

2.權利要求1所述的重組酵母細胞，其中所述內源基因中的一個或多個突變是在基因ISU1、YFH1、NFS1、AFT1、AFT2、YAP5、FRA1、FRA2、GREX3、GREX4、CCC1、或其任意組合中。

3.權利要求1或2所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞包含內源ISU1基因中的一個或多個突變，所述突變產生包含選自D71N、D71G和S98F的至少一個氨基酸置換的多肽，其中所述置換的位置對應于SEQ ID NO:29的氨基酸位置。

4.權利要求2至3中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞包含內源YFH1基因中的一個或多個突變，所述突變產生包含T163P置換的多肽，其中所述置換的位置對應于SEQ ID NO:31的氨基酸位置。

5.權利要求2至4中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞包含內源NFS1基因中的一個或多個突變，所述突變產生包含選自L115W和E458D的至少一個氨基酸置換的多肽，其中所述置換的位置對應于SEQ ID NO:33的氨基酸位置。

6.權利要求2至5中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞包含導致升高的Aft1活性的內源AFT1基因中的突變，和/或導致升高的Aft2活性的內源AFT2基因中的突變。

7.權利要求2至6中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞包含一個或多個內源基因FRA1、FRA2、GREX3或GREX4中的一個或多個突變；其中所述一個或多個突變導致升高的Aft1和/或Aft2的活性；和/或其中所述一個或多個突變導致由Aft1和/或Aft2調節的一種或多種基因的表達升高。

8.權利要求7所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞還包含選自YAP5和CCC1的內源基因中的突變。

9.權利要求1至8中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述異源基因(a)選自AFT1、AFT2和直系同源物及其組合。

10.權利要求1至8所述的重組酵母細胞，其中異源基因(a)編碼的蛋白提高Aft1和/或Aft2的活性和/或提高AFT1和/或AFT2的表達，和/或使遏制(suppress)或抑制(inhibit)Aft1和/或Aft2的活性和/或遏制(suppress)或抑制(inhibit)AFT1和/或AFT2的表達的蛋白的活性和/或表達被遏制(suppress)或抑制(inhibit)。

11.權利要求1至10中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述異源基因(a)編碼Aft1和/或Aft2的靶點。

12.權利要求1至10中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述異源基因(a)編碼具有鐵轉運活性的多肽。

13.權利要求1至12中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述異源基因(b)編碼與選自SEQ ID NO:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、35、37、39和41的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％或100％的序列同一性的多肽。

14.權利要求1至13中任一項所述的重組酵母細胞，其中所述重組酵母細胞還包含一種或多種編碼戊糖磷酸途徑的蛋白的內源基因的至少一種遺傳修飾。