[發明專利]全血樣品的穩定化

有效

• 申請號: 201580054390.3
• 申請日: 2015-07-31
• 公開（公告）號: CN106796219B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: R·桑德琳;K·王;S·泰西耶;M·托納
• 申請（專利權）人: 通用醫療公司
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

1.一種使全血樣品中的有活力的、未固定的細胞穩定化的方法，所述方法包括：

將來自于受試者的包含有活力的、未固定的細胞的全血樣品收集到含有枸櫞酸鹽抗凝劑的容器中，

向所述樣品引入包含24-48mM HEPES、0.11-0.44mM腺嘌呤、2.25-6.75mM甘露糖醇、0.39-1.54mM N-乙酰-L-半胱氨酸、0-13.5mM右旋糖、和0-17mM NaCl的保存制劑；

向所述樣品添加Ficoll聚合物，其中所述Ficoll聚合物包含Ficoll 70并且添加到所述樣品中以產生至少10％的Ficoll 70；和

向所述樣品引入胱天蛋白酶抑制劑，血小板抑制劑，或胱天蛋白酶抑制劑和血小板抑制劑兩者，由此使所述全血樣品中的有活力的、未固定的細胞穩定化。

2.根據權利要求1所述的方法，其中胱天蛋白酶抑制劑是(3S)-5-(2,6-二氟苯氧基)-3-[[(2S)-3-甲基-2-(喹啉-2-羰基氨基)丁酰基]氨基]-4-氧代戊酸；甲基(3S)-5-氟-3-[[(2S)-2-[[(2S)-3-甲基-2-(苯基甲氧基羰基氨基)丁酰基]氨基]丙酰基]氨基]-4-氧代戊酸酯；(S)-甲基5-(2,6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(喹啉-2-羧酰胺基)丁酰胺基)-4-氧代戊酸酯；或5-氟-3-[(2-甲基丙烷-2-基)氧羰基氨基]-4-氧代戊酸甲酯。

3.根據權利要求1所述的方法，其中添加足夠的胱天蛋白酶抑制劑至所述樣品以實現2-10μM的終濃度。

4.根據權利要求3所述的方法，其中添加足夠的胱天蛋白酶抑制劑至所述樣品以實現5μM的終濃度。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述保存制劑包含48mM HEPES、0.44mM腺嘌呤、6.75mM甘露糖醇、0.77mM N-乙酰-L-半胱氨酸和8.5mM NaCl。

6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其中向所述樣品引入血小板抑制劑并且使血液在2-25℃儲存。

7.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其中將血液樣品儲存72-96小時。

8.根據權利要求1所述的方法，其中向所述樣品引入血小板抑制劑，其中所述血小板抑制劑是替卡格雷、西洛他唑、普拉格雷、雙嘧達莫、替羅非班、依替巴肽、氯吡格雷或KF38789。

9.根據權利要求1或8所述的方法，其中將所述血小板抑制劑添加至所述樣品以實現0.01-100μg/mL的終濃度。

10.根據權利要求9所述的方法，其中將所述血小板抑制劑添加至所述樣品以實現0.01-1μg/ml的終濃度。

11.根據權利要求9所述的方法，其中將所述血小板抑制劑添加至所述樣品以實現0.01-0.5μg/mL的終濃度。

12.根據權利要求1或8所述的方法，其中使血液樣品在2-25℃儲存。

13.根據權利要求12所述的方法，其中使血液樣品在4℃儲存。

14.根據權利要求1或8所述的方法，其中將血液樣品在2-25℃維持至少24小時。

15.根據權利要求14所述的方法，其中將血液樣品在2-25℃維持至少36小時。

16.根據權利要求14所述的方法，其中將血液樣品在2-25℃維持至少48小時。

17.根據權利要求14所述的方法，其中將血液樣品在2-25℃維持至少72小時。