[發(fā)明專利]通過血管灌注來導入和除去高濃度的冷凍保護劑的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580051464.8
• 申請日: 2015-07-28
• 公開（公告）號: CN107105638A
• 公開（公告）日: 2017-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: G.M.法伊
• 申請（專利權(quán)）人: 二十一世紀藥學股份有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所11105
• 代理人: 張文輝

對相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求于2014年7月29日提交的美國臨時申請?zhí)?2/030,205的權(quán)益，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及通過冷凍或通過玻璃化保存血管化組織和器官。它涉及器官和組織冷凍保存或存放。它還涉及用冷凍保護作用劑(也稱為冷凍保護劑)的組織和器官灌注。本發(fā)明是針對組織、器官、甚至整個生物體的冷凍保護劑添加和除去的先前已知方法的改善。

發(fā)明背景

本公開涉及通過血管灌注引入和除去高濃度的冷凍保護劑的方法。例如，F(xiàn)ahy等人，2009已經(jīng)使兔腎能夠在生命支持的情況下玻璃化和移植，但是此成就受到針對腎髓質(zhì)中的冰形成的保護不足限制。在一個方面，本申請解決了冷凍保護劑的血管灌注中的這種和其它缺陷。

通常，通過血管灌注引入可玻璃化濃度的冷凍保護劑受到隨著濃度升高而增加的粘度限制。逐步升高灌注壓以實現(xiàn)更大的流速(Fahy等人，2009；美國專利8,679,735B2)已經(jīng)與兔腎中增加的損傷相關(guān)，已被認為增加了從血管床到間質(zhì)流體的反作用(counterproductive)流體轉(zhuǎn)移的風險，已經(jīng)顯示jiu用冷凍保護劑平衡的功效而言的可變/不一致的結(jié)果，并且已經(jīng)以任意方式完成。本申請解決這些方法和理論問題。

Sadri描述了一種灌注裝置，其可以在生理條件下允許器官的恒定壓力或恒定流灌注(US 5,338,662A)。然而，Sadri描述了此系統(tǒng)對冷凍保護劑的組織或器官灌注的問題的無應(yīng)用，并且沒有解決本文中所述的任何過程或問題。本申請不是用于裝置，而是用于與正常生理灌注無關(guān)的方法。

發(fā)明概述

本公開涉及灌注方法(在本文中稱為FlowLock方法)，其特別適合于以下述方式將冷凍保護劑，特別是可玻璃化濃度的冷凍保護劑分布貫穿血管系統(tǒng)，使得在使對作為生物“個體”的每個輸注的生物系統(tǒng)的損傷最小化的情況下加速組織與冷凍保護劑的平衡，使得能夠遵循可適應(yīng)具有不同血管阻力的生物系統(tǒng)的標準方案。該方法旨在解決灌注含有冷凍保護劑的高粘度含水灌注液的問題，在動脈灌注液和灌注的組織或器官或器官系統(tǒng)或生物體之間平衡那些冷凍保護劑上沒有過度延遲，且不損害灌注的組織、器官、器官系統(tǒng)、或生物體。同時，該方法旨在提供在添加和除去冷凍保護劑期間控制動脈壓的方式。

在一個實施方案中，本公開的方法的特征可以在于用于通過血管灌注用冷凍保護劑平衡生物系統(tǒng)(組織、器官、器官系統(tǒng)或生物體)的方法，其包括：

a)對用于所述灌注過程的動脈流速設(shè)置(指定)下限；

b)在恒定的第一動脈灌注壓下增加動脈灌注液中的冷凍保護劑的濃度，直到所述灌注液的上升粘度引起所述動脈流速下降為變得等于對步驟a)的動脈流速設(shè)置的所述下限；

c)在步驟a)的動脈流速的設(shè)置下限處將所述動脈流速保持恒定；

d)由于上升的灌注液粘度與步驟a)和c)的動脈流速的恒定下限組合，允許動脈灌注壓從步驟b)的第一動脈灌注壓升高到等于或低于預設(shè)置的最大動脈灌注壓的更高壓力；然后

e)

i.如果所述動脈灌注壓沒有達到上述步驟d)的預設(shè)置最大動脈灌注壓，則繼續(xù)以步驟a)的動脈流的設(shè)置下限灌注所述生物系統(tǒng)，或者，

ii.如果所述動脈灌注壓達到上述步驟d)的預設(shè)置最大動脈灌注壓，則可以根據(jù)需要，允許動脈流速下降到上述步驟a)的動脈流的設(shè)置下限以下，以將所述動脈灌注壓維持于步驟d)的所述預設(shè)置最大動脈灌注壓。

用于添加和除去冷凍保護劑的增強的安全性的改善的方法

在另一個實施方案中，本公開還提供了用于通過血管灌注用冷凍保護劑平衡生物系統(tǒng)(組織、器官、器官系統(tǒng)或生物體)，然后以增強的安全性除去所述冷凍保護劑的改進的方法，包括關(guān)于添加冷凍保護劑描述的方法的所有上述步驟a)-e)，隨后：

f)在灌注所述生物系統(tǒng)時，通過開始升高所述動脈灌注液的溫度或通過降低所述動脈灌注液的冷凍保護劑濃度，或這兩種方式來降低所述動脈灌洗液的粘度，然后；

g)如果所述動脈灌注壓在上述步驟d)的所述預設(shè)置最大值以下，則繼續(xù)以上述步驟a)的動脈流速的所述設(shè)置下限灌注所述生物系統(tǒng)，直到動脈壓力下降到上述步驟b)的所述第一動脈灌注壓，此后通過根據(jù)完成這點的需要增加所述動脈流速，將所述動脈灌注壓維持于上述步驟b)的所述第一動脈灌注壓；或者