[發明專利]由干細胞分化肝細胞樣細胞

有效

• 申請號: 201580050446.8
• 申請日: 2015-09-17
• 公開（公告）號: CN107075467B
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 余嚴軍;D·潘;Y.C·卓;F·塔斯尼姆
• 申請（專利權）人: 新加坡科技研究局
• 主分類號: C12N5/07
• 分類號: C12N5/07;C12N5/074;C12N5/0735;G01N33/50
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 胡春光;張穎玲

1.一種分化定形內胚層以便獲得肝細胞樣細胞的方法，其中所述方法包括：a) 使定形內胚層經受至少一種表觀遺傳調節劑以獲得成肝細胞，b) 使所述成肝細胞經受至少一種干細胞分化通路抑制劑以獲得肝細胞樣細胞，其中所述至少一種表觀遺傳調節劑選自由丁酸鈉和二甲基亞砜（DMSO）組成的組；并且其中所述至少一種干細胞分化通路抑制劑選自由4-(4-(苯并[d][1,3]二氧雜環戊烯-5-基)-5-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并-2-基)苯甲酰胺(SB431542)和DMSO組成的組；其中步驟a)和b)不包括使用生長因子。

2.權利要求1所述的方法，其中所述方法還包括，在步驟 a)之前，使干細胞經受通過抑制激酶活性來調節干細胞分化的至少一種化合物和至少一種生長因子以獲得所述定形內胚層，其中調節干細胞分化的所述至少一種化合物選自由2-嗎啉-4-基-8-苯基苯并吡喃-4-酮(LY294002)和6-溴靛玉紅-3’-肟(BIO)組成的組；并且其中所述至少一種生長因子是激活素。

3.權利要求2所述的方法，其中所述激活素是激活素A、激活素AB或激活素B。

4.一種篩選藥物的方法，其中所述方法包括：進行根據權利要求1至3中任一項所述的方法以獲得肝細胞樣細胞；使所述肝細胞樣細胞經受測試樣品并測量所述肝細胞樣細胞的活力和/或測量所述肝細胞樣細胞的功能表型。

5.權利要求4所述的方法，其中藥物篩選用于選自由下列各項組成的組的應用：藥物毒性篩選、藥物細胞毒性評估細胞治療、組織工程和組織再生。