[發明專利]多劑量注射用樹突狀細胞疫苗的制備及用于阻斷HER2和HER3的聯合治療

在審

• 申請號: 201580050434.5
• 申請日: 2015-07-17
• 公開（公告）號: CN107109365A
• 公開（公告）日: 2017-08-29
• 發明（設計）人: 布萊恩·J·赫爾尼奇;加里·K·科斯基
• 申請（專利權）人: 布萊恩·J·赫爾尼奇
• 主分類號: C12N5/0784
• 分類號: C12N5/0784
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司11279
• 代理人: 田昕,司麗春

相關申請的交叉引用

本申請要求以下優先權：于2014年7月17日提交的美國臨時申請序列號62/025,673的優先權，于2015年5月22日提交的美國臨時申請序列號62/165,445的優先權，于2014年7月17日提交的美國臨時申請序列號62/025,685的優先權，以及于2014年7月24日提交的美國臨時申請序列號62/029,774的優先權，在此將每一項優先權的內容以全文引入的方式并入本文。

背景技術

樹突狀細胞(DCs)是從微生物或者甚至癌細胞獲得蛋白質抗原并予以顯示，或將這些抗原遞呈給T細胞的白細胞。因此被所述樹突狀細胞激活的所述T細胞之后發起系統性免疫應答來挑戰威脅。傳統的針對微生物的疫苗包含被稱為“佐劑”的添加劑，其通過若干可能的方法在接種疫苗的個體內增強樹突狀細胞活性并擴大疫苗誘導的免疫應答。然而針對癌癥的疫苗需求，存在許多特殊的問題。例如，傳統的佐劑不會給樹突狀細胞提供允許其發起針對癌癥的最佳免疫的適當信號。并且，腫瘤自身會產生一種影響樹突狀細胞適當激活的環境。

對于該問題的流行解決方案是從癌癥患者中提取樹突狀細胞，在體外使其加載上腫瘤抗原，然后在將其重新施用于身體之前對此細胞提供獨特的激活信號。這樣保證了去除了腫瘤環境影響的適當的樹突狀細胞激活。當返回到身體時，所述樹突狀細胞可以與T細胞相互作用并發起強有力的抗腫瘤免疫。鑒于使用額外的有形化的樹突狀細胞已經解決了許多有效性問題，其歷史上是以現實局限性為代價的。例如，由于樹突狀細胞疫苗包含活細胞，在施用治療的醫療中心的實際位置處需要特殊的細胞加工和疫苗生產的設備。由于每個給予所述治療的機構必須建設并維持其自身的具有該特殊用途的設施，因此，這是一種昂貴且低效的遞送治療的方式。

乳腺癌的管理目前依賴于早期診斷和積極治療，其可以包括一種或多種治療，例如手術，放射治療，化學療法和激素療法。赫塞汀(曲妥單抗)被開發作為HER2/ErbB2陽性乳腺癌細胞的靶向治療方法，常常與其他療法聯合應用，其他療法包括有絲分裂抑制劑紫杉醇(其出售的商品名為Taxol)。

赫塞汀作為單一療法的功效被評估為小于30％；與微管穩定藥物，例如紫杉醇，進行組合治療的功效提高至約60％(Burris et al.,2000,Semin Oncol 27:19-23)。用赫塞汀治療導致Cdk抑制劑p27的積累和隨后的G1/S細胞周期停滯，并且紫杉醇停止有絲分裂的進入，其可以導致細胞死亡。盡管具有巨大前景，然而高劑量的赫塞汀或紫杉醇導致不良副作用。進一步，癌癥經常對赫塞汀和/或紫杉醇產生抗性。

因此，仍然迫切需要用于生產最大化治療的樹突狀細胞疫苗的組分和有效方法，以及迫切需要使用赫塞汀治療癌癥的新方法。相應地，本領域需要額外的免疫治療途徑來治療或預防乳腺癌和其他惡性腫瘤。本發明滿足了這種需求。

附圖說明

當結合附圖進行閱讀時，如下優選實施例的具體描述將得到更好地理解。為了說明本發明，在附圖中示出了目前優選的實施例。然而，應該理解，本發明不是受限于附圖中示出的實施例的精確排列和手段。

圖1是一個圖表，其示出了冷凍保存的DC1的生活力和產率。當細胞被直接解凍和計數時，細胞的復蘇平均為89％和生活力為95％。

圖2是一個圖表，其示出了細胞間的生活力(p＝.4807)和復蘇(p＝.1220)沒有顯著差異。

圖3是一個圖表，其示出了兩個種群具有相似的初始(添加LPS 7小時后)IL-12 p70的分泌(p＝.0768)。所述種群在30小時的觀察期內繼續展示出相當的IL-12 p70的分泌水平，在所述種群之間沒有顯著差異。

圖4是一個圖表，其示出了在種群之間和IL-1β(p＝0.7690)，IL-1α(p＝0.0841)，Rantes(p＝0.902)，MDC(p＝0.1514)，IL-10(p＝.1937)，MIP-1α(p＝.2673)，IP-10(p＝0.7366)，IL-6(p＝0.24)，IL-5(p＝0.0735)，TNF-β(p＝0.9422)，IL-15(p＝0.8878)，MIP-1β(p＝0.9217)，TNF-α(p＝0.8972)，IL-8(p＝0.7844)的生產中沒有顯著差異。

圖5是一個圖表，其示出了從冷凍保存的和非冷凍保存的樹突狀細胞的IFN-γ的分泌。