[發明專利]多劑量注射用樹突狀細胞疫苗的制備及用于阻斷HER2和HER3的聯合治療

在審

• 申請號: 201580050434.5
• 申請日: 2015-07-17
• 公開（公告）號: CN107109365A
• 公開（公告）日: 2017-08-29
• 發明（設計）人: 布萊恩·J·赫爾尼奇;加里·K·科斯基
• 申請（專利權）人: 布萊恩·J·赫爾尼奇
• 主分類號: C12N5/0784
• 分類號: C12N5/0784
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司11279
• 代理人: 田昕,司麗春

1.一種產生可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗的方法，所述方法包括：

將至少一種抗原與樹突狀細胞(DC)接觸；

用至少一種TLR激動劑激活所述樹突狀細胞；

以多劑量的形式冷凍保存所述樹突狀細胞，其中所述多劑量包括初始免疫劑量和多個加強劑量；

其中當解凍所述樹突狀細胞時，所述樹突狀細胞產生有效量的至少一種細胞因子以產生T細胞應答。

2.根據權利要求1所述的方法，進一步包括解凍所述樹突狀細胞，其中所述樹突狀細胞產生有效量的至少一種細胞因子以產生T細胞應答。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述抗原是腫瘤抗原。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述抗原是病毒抗原。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述TLR激動劑是LPS。

6.根據權利要求1所述的方法，包括使用IFN-γ激活所述樹突狀細胞。

7.根據權利要求1所述的方法，其中所述冷凍保存包括在包含約55％的勃脈力，約40％人血清白蛋白，和約5％DMSO的冷凍培養基中冷凍所述樹突狀細胞。

8.根據權利要求7所述的方法，其中所述冷凍保存包括在約-70℃或更低的溫度下冷凍所述樹突狀細胞。

9.根據權利要求1所述的方法，其中解凍后所述樹突狀細胞的復蘇和生活力大于或等于約70％。

10.根據權利要求1所述的方法，其中解凍后所述樹突狀細胞的復蘇和生活力大于或等于約80％。

11.根據權利要求1所述的方法，其中冷凍保存所述樹突狀細胞至少約1周。

12.根據權利要求1所述的方法，其中所述細胞因子是IL-12。

13.根據權利要求1所述的方法，其中通過所述樹突狀細胞能夠裂解靶細胞，所述樹突狀細胞展示出殺傷功能。

14.一種用于激發哺乳動物內的免疫應答的冷凍保存的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，所述可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗包括：

加載有至少一種抗原的樹突狀細胞；

其中所述樹突狀細胞通過暴露于至少一種TLR激動劑而被激活；和

其中所述樹突狀細胞產生有效量的至少一種細胞因子以產生T細胞應答。

15.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述抗原是腫瘤抗原。

16.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述抗原是病毒抗原。

17.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述TLR激動劑是LPS。

18.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述樹突狀細胞通過暴露于IFN-γ而被激活。

19.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述疫苗已經在約-70℃或更低的溫度下在包含約55％的勃脈力，約40％的人血清白蛋白和約5％DMSO的冷凍培養基中冷凍保存。

20.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中解凍后所述樹突狀細胞的復蘇和生活力大于或等于約70％。

21.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中解凍后所述樹突狀細胞的復蘇和生活力大于或等于約80％。

22.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述組合物冷凍保存至少約一周。

23.根據權利要求14所述的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗，其中所述細胞因子是IL-12。

24.一種在哺乳動物中激發免疫應答的方法，包括向有此需要的哺乳動物施用權利要求14所述的冷凍保存的可注射的多劑量的抗原脈沖的樹突狀細胞疫苗的劑量。