[發明專利]抗體純化方法

有效

• 申請號: 201580050412.9
• 申請日: 2015-07-27
• 公開（公告）號: CN107001408B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: D·梅;T·阿托拉格貝;G·M·法夸爾森;S·沙班;M·科勒克;G·米特拉
• 申請（專利權）人: 聯合治療學有限公司;以秘書處;衛生和人類服務部為代表的美利堅合眾國
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/34;C07K1/36;C07K16/30;B01D15/12;B01D15/18;B01D15/24;B01D15/36;B01D15/38
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎;楊昀

1.一種純化生物組合物的方法，包括用磷酸鹽緩沖液(PBS)對生物組合物進行滲濾，從而獲得純化組合物，其中，所述生物組合物含有至少一種雜質，所述雜質是二(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷(Bis-tris)，所述生物組合物包含ch14.18單克隆抗體。

2.如權利要求1所述的方法，所述生物組合物中Bis-tris的濃度為pH6.3至6.7下10至50mM Bis-tris。

3.如權利要求1所述的方法，所述滲濾從所述生物組合物去除至少50％的Bis-tris。

4.如權利要求1所述的方法，所述滲濾從所述生物組合物去除至少70％的Bis-tris。

5.如權利要求1所述的方法，PBS的濃度是10至50mM磷酸鈉和100至200mM NaCl。

6.如權利要求1所述的方法，在被滲濾成為含PBS的組合物之前，所述ch14.18單克隆抗體被濃集至至少2.0至5.0AU的濃度。

7.如權利要求1所述的方法，在被滲濾成為含PBS的組合物之前，所述ch14.18單克隆抗體被濃集至至少4.0至6.0AU的濃度。

8.如權利要求1所述的方法，還包括用至少一種層析柱分離和純化所述ch14.18單克隆抗體。

9.如權利要求8所述的方法，包括用至少一種親和層析柱、至少一種陽離子交換層析柱和/或至少一種陰離子交換層析柱分離和純化所述ch14.18單克隆抗體。

10.如權利要求9所述的方法，所述陰離子交換層析柱是Capto^TM附著柱。

11.如權利要求10所述的方法，用含Bis-tris的組合物從Capto^TM附著柱上洗脫所述ch14.18單克隆抗體。

12.如權利要求1所述的方法，將至少三體積單位生物組合物滲濾成為一體積單位的含PBS的組合物。

13.如權利要求1所述的方法，將至少五體積單位生物組合物滲濾成為一體積單位的含PBS的組合物。

14.如權利要求1所述的方法，將純化的組合物再度滲濾成為含組氨酸的組合物。

15.一種純化ch14.18單克隆抗體的方法，包括：

(a)使含所述ch14.18單克隆抗體的第一組合物過親和層析柱，得含所述ch14.18單克隆抗體的第二組合物；

(b)將第二組合物pH調低，得第三組合物；

(c)用溶劑-除垢劑清洗第三組合物，得第四組合物；

(d)清洗第四組合物以去除溶劑-除垢劑，得第五組合物；

(e)使第五組合物過陽離子交換層析柱，得含所述ch14.18單克隆抗體的第六組合物；

(f)對第六組合物進行納濾，得第七組合物；

(g)使第七組合物過陰離子交換層析柱，得到含所述ch14.18單克隆抗體和Bis-tris的第八組合物：以及

(h)滲濾第八組合物成為含PBS的組合物，得含有所述ch14.18單克隆抗體且基本不含Bis-tris的第九組合物。