[發明專利]在微生物中產生油的方法

有效

• 申請號: 201580038746.4
• 申請日: 2015-05-21
• 公開（公告）號: CN106795539B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 孫志勇;羅伯托·E·阿門塔;麥西亞·瓦倫蒂恩
• 申請（專利權）人: 瑪拉可再生能源公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12N1/00;C12N1/10;C12P7/40
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.一種用于產生一種或多種多不飽和脂肪酸的方法，所述方法包括：

(a) 提供能夠產生多不飽和脂肪酸的破囊壺菌屬微生物，其中所述微生物的ATCC保藏號為PTA-6245；

(b) 提供包含第一濃度水平的一種或多種碳源的培養基，所述第一濃度水平為200至250 g/L；

(c) 在所述培養基中培養所述破囊壺菌屬微生物，直至第一碳源濃度水平減小至0-20g/L；

(d) 向所述培養基添加第二量的一種或多種碳源，以將碳源濃度增加至第二濃度水平，其中所述一種或多種碳源的所述第二濃度水平為200至250 g/L；以及

(e) 在所述培養基中在足以產生所述一種或多種多不飽和脂肪酸的條件下培養所述破囊壺菌屬微生物。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述碳源選自由以下組成的組：脂肪酸、脂質、碳水化合物、多元醇和氨基糖。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述碳源為甘油。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述碳源為葡萄糖。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述培養基的pH為2至4.5。

6.如權利要求5所述的方法，其中所述培養基的pH為3至3.5。

7.如權利要求1所述的方法，其還包括分離所述多不飽和脂肪酸。

8.如權利要求7所述的方法，其中在分離所述多不飽和脂肪酸之前，不對所述培養基進行滅菌。

9.如權利要求8所述的方法，其中滅菌包括增加溫度。

10.如權利要求1所述的方法，其中所述多不飽和脂肪酸為中鏈脂肪酸。

11.如權利要求1所述的方法，其中所述一種或多種多不飽和脂肪酸選自由以下組成的組：花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十二碳五烯酸、二十碳五烯酸、亞油酸、亞麻酸以及其組合。

12.如權利要求11所述的方法，其中所述亞麻酸是α亞麻酸、γ-亞麻酸或其組合。

13.如權利要求1所述的方法，其中步驟（c）包括監測碳源濃度，直至所述碳源濃度減小至0-20 g/L。

14.如權利要求1所述的方法，其還包括，在添加所述第二量的所述一種或多種碳源之后，培養所述微生物，直至所述一種或多種碳源的所述碳源濃度減小至低于所述第二濃度水平，以及向所述培養基添加第三量的一種或多種碳源，以將所述碳源濃度增加至第三濃度水平，其中所述一種或多種碳源的所述第三濃度水平大于200 g/L，并且其中當所述碳源濃度減小至0至20 g/L時，向所述培養基添加所述第三量的所述一種或多種碳源。

15.如權利要求14所述的方法，其還包括，在添加所述第三量的所述一種或多種碳源之后，培養所述微生物，直至所述一種或多種碳源的所述碳源濃度減小至低于所述第三濃度水平，以及向所述培養基添加第四量的一種或多種碳源，以將所述碳源濃度增加至第四濃度水平，其中所述一種或多種碳源的所述第四濃度水平大于200 g/L，并且其中當所述碳源濃度減小至0至20 g/L時，向所述培養基添加所述第四量的所述一種或多種碳源。

16.如權利要求13所述的方法，其中所述方法包括一次或多次監測所述碳源濃度。

17.如權利要求13所述的方法，其中所述方法還包括在所述量的所述一種或多種碳源的添加之間一次或多次監測所述碳源濃度。

18.如權利要求13所述的方法，其中所述監測還包括測量溶解氧水平。