[發(fā)明專利]嵌合自身抗體受體T細胞的組合物和方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580036310.1
• 申請日: 2015-05-01
• 公開（公告）號: CN107074929B
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設計）人: A·S·佩恩;C·T·依尼布萊希特;V·博杰;M·C·米龍
• 申請（專利權）人: 賓夕法尼亞大學董事會
• 主分類號: C07K14/705
• 分類號: C07K14/705;C07K19/00;C07K14/47
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 王永偉;丁秀云

本發(fā)明包括包含對自身抗體特異的至少一種嵌合自身抗體受體(CAAR)的組合物，包括其的載體，包括包裝在病毒顆粒中的CAAR載體的組合物和包括CAAR的重組T細胞。本發(fā)明還包括制備表達CAAR(CAART)的遺傳修飾的T細胞的方法，其中該所表達的CAAR包括橋粒芯蛋白胞外結構域。

相關申請的交叉引用

本申請要求2014年5月2日提交的美國臨時申請?zhí)?1/987,989的優(yōu)先權和權益，該申請通過引用以其全文并入本文。

關于聯(lián)邦資助的研究或開發(fā)的聲明

本發(fā)明是根據(jù)由美國國立衛(wèi)生研究院(National Institutes of Health)授予的AR057001在政府支持下進行。政府在本發(fā)明中享有一定的權利。

背景技術

自身免疫是美國第三最常見的疾病類型，影響8％的人口。有兩種基本類型的自身免疫性疾病：主要由T細胞引起的那些，以及主要由B細胞和它們產生的自身抗體引起的那些。尋常性天皰瘡(PV)是模型自身抗體介導的疾病，其中針對皮膚細胞粘附蛋白橋粒芯蛋白3(Dsg3)的自身抗體引起皮膚和粘膜的潛在致命的起泡。

目前的療法集中于一般免疫抑制以減少所有抗體，但這些策略還靶向保護我們免受感染的良好抗體。因為天皰瘡是慢性緩解-復發(fā)性疾病，所以這種治療與多種副作用相關，包括致命感染和繼發(fā)性癌癥的風險。例如，已報道利妥昔單抗(抗CD20單克隆抗體試劑)在治療尋常性天皰瘡中具有優(yōu)異的功效，其中95％的患者在3個月內實現(xiàn)水皰的完全愈合，并且35％的患者在長期隨訪期間實現(xiàn)所有全身治療的完全緩解。然而，大于80％的患者將復發(fā)(大概因為利妥昔單抗的CD20+B細胞消耗的功效通常是不完全的)，并且嚴重感染并不罕見，據(jù)報道在7％的用利妥昔單抗治療的自身免疫性疾病患者中發(fā)生，其中致命感染為1％-2％。因此，患有嚴重自身免疫性疾病(如尋常性天皰瘡、副腫瘤天皰瘡或落葉型天皰瘡)的患者不再因其疾病而死亡，而是患有治療并發(fā)癥。

然而，目前不存在PV的治療僅靶向自身反應性B細胞的治療策略。系統(tǒng)性皮質類固醇、硫唑嘌呤、霉酚酸酯和環(huán)磷酰胺在治療PV方面有效，但非特異性抑制淋巴細胞增殖。利妥昔單抗靶向在大多數(shù)B細胞上表達的CD20，但是缺乏僅對自身反應性B細胞的特異性。

因此，治療策略可以引起與一般免疫抑制相關的嚴重副作用，包括致命感染和繼發(fā)性癌癥。因此，存在對僅靶向自身反應性B細胞的治療的需要。

本發(fā)明的概述

如下所述，本發(fā)明包括對自身抗體具有特異性的嵌合自身抗體受體(CAAR)的組合物及其使用方法。

本發(fā)明的一方面包括編碼嵌合自身抗體受體(CAAR)的分離的核酸序列，其中分離的核酸序列包括自身抗原的核酸序列或其片段、跨膜結構域的核酸序列、共刺激分子的胞內結構域的核酸序列和信號傳導結構域的核酸序列。

在另一方面，本發(fā)明包括載體，該載體包括本文所述的分離的核酸序列。

在仍另一方面，本發(fā)明包括分離的嵌合自身抗體受體(CAAR)，該嵌合自身抗體受體包括包含自身抗原或其片段的胞外結構域、跨膜結構域和胞內信號傳導結構域。

在又另一方面，本發(fā)明包括包含本文所述的CAAR的遺傳修飾的細胞。

在上述方面或本文描述的本發(fā)明的任何其他方面的各種實施方式中，自身抗原選自：Dsg1、Dsg3及其片段。在一個實施方式中，自身抗原包括Dsg3，該Dsg3包括選自以下的氨基酸序列：SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ IDNO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、和SEQ ID NO：36。