[發(fā)明專利]針對(duì)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶B-raf(BRAF)的SRM/MRM測(cè)定

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580035587.2
• 申請(qǐng)日: 2015-07-13
• 公開（公告）號(hào): CN106796238B
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 大衛(wèi)·B·克里茨曼;托德·哈姆布拉夫;史諾·塞帕洛姆比爾;遼衛(wèi)禮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 愛科譜迅病理研究公司
• 主分類號(hào): G01N33/66
• 分類號(hào): G01N33/66
• 代理公司: 北京潤(rùn)平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 劉依云;喬雪微

1.一種用于檢測(cè)和定量蛋白質(zhì)消化物中的BRAF片段肽的含量的試劑在制備用于測(cè)量福爾馬林固定組織的生物樣品中BRAF酪氨酸激酶受體蛋白質(zhì)BRAF水平的試劑中的應(yīng)用，其中所述片段肽為SEQ ID NO:4所示的肽，且

其中所述BRAF片段肽的含量使用質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)和定量；且

其中所述水平是相對(duì)水平或絕對(duì)水平。

2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，在檢測(cè)和定量所述BRAF片段肽的含量之前對(duì)所述蛋白質(zhì)消化物進(jìn)行分級(jí)。

3.權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其中所述分級(jí)的步驟選自液相色譜、納米反相液相色譜、高效液相色譜或反相高效液相色譜。

4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述蛋白質(zhì)消化物包括蛋白酶消化物。

5.權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其中所述蛋白質(zhì)消化物包括胰蛋白酶消化物。

6.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述質(zhì)譜包括串聯(lián)質(zhì)譜、離子阱質(zhì)譜、三重四極質(zhì)譜、MALDI-TOF質(zhì)譜、MALDI質(zhì)譜和/或飛行時(shí)間質(zhì)譜。

7.權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中使用的質(zhì)譜模式是選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)SRM、多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM和/或多選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)mSRM。

8.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述組織是石蠟包埋的組織。

9.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述組織獲自腫瘤。

10.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中定量所述BRAF片段肽水平包括比較一種生物樣品中BRAF片段肽的含量與不同且單獨(dú)的生物樣品中相同BRAF片段肽的含量。

11.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中定量BRAF片段肽水平包括通過與已知含量的添加的內(nèi)標(biāo)肽相比較來確定生物樣品中所述BRAF片段肽的含量，其中所述生物樣品中所述BRAF片段肽的含量與具有相同氨基酸序列的內(nèi)標(biāo)肽相比較。

12.權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其中所述內(nèi)標(biāo)肽是同位素標(biāo)記的肽。

13.權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其中所述同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)肽包含選自¹⁸O、¹⁷O、³⁴S、¹⁵N、¹³C、²H和其組合的一種或多種重穩(wěn)定同位素。