[發明專利]GIP上升抑制劑的評價或選擇方法

有效

• 申請號: 201580015560.7
• 申請日: 2015-03-06
• 公開（公告）號: CN106133519B
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發明（設計）人: 古賀義隆;大崎紀子;渡邊學
• 申請（專利權）人: 花王株式會社
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15;C12Q1/02;C12Q1/68;G01N33/50;G01N33/68
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司11322
• 代理人: 龍淳,陳明霞

技術領域

本發明涉及一種GIP上升抑制劑的評價或選擇方法。

背景技術

GIP(葡萄糖依賴性促胰島素多肽，glucose-dependent insulinotropic polypeptide)是通過攝取脂質或糖質、氨基酸而由消化道上皮的分泌細胞(K細胞)分泌的腸促胰島素(incretin)。GIP葡萄糖依賴性地促進從胰臟β細胞中分泌胰島素，有助于血糖值的調節。近年來，報告了人為地提高了血中GIP濃度的小鼠在攝取高脂肪飲食下可以抑制脂質燃燒。另外，明確了GIP受體欠缺小鼠可以抑制由于高脂肪食物負荷產生的內臟脂肪或皮下脂肪的積蓄。根據這些發現，認為餐后的GIP調節對肥胖預防或改善有效。進一步，由于已知GIP具有胃酸分泌抑制作用和胃運動抑制作用，因此，認為GIP上升抑制對餐后的消化促進和胃積食的改善有效。因此，期望開發抑制GIP的上升的物質，為此，尋求開發能夠以高靈敏度迅速地評價物質的GIP上升抑制能力的方法。

作為現有的GIP上升抑制劑的評價或選擇方法，已知有將細胞中的CPT1基因或CPT1蛋白質的表達、或者CPT1蛋白質的活性作為指標的方法(專利文獻1)；將FAT/CD36基因或FAT/CD36蛋白質的表達作為指標的方法(專利文獻2)等。

FABPs(脂肪酸結合蛋白，fatty acid-binding proteins)是細胞內的脂肪酸結合蛋白家族，并且是對脂肪酸具有高接合性的14～15kDa的蛋白質(非專利文獻1、2)。脂肪酸具有能量源、代謝控制的信號分子等細胞內多種功能。FABPs通過與不溶性的脂肪酸結合能夠向細胞內的各種器官輸送，從而在脂肪酸的功能表達中產生重要的作用。

FABPs的同源異構體(isoform)即FABP4和FABP5與和氨基酸序列立體結構的同源性(homology)高的脂肪細胞和巨噬細胞(macrophage)共表達(非專利文獻2～4)。關于FABP4和FABP5，進行使用了基因敲除小鼠的功能分析(非專利文獻2～15)。FABP4占脂肪細胞的細胞質蛋白質的1～3％，被作為脂肪細胞的分化標記而廣泛地利用(非專利文獻5)。對于FABP4，在脂肪細胞中除了作為分子伴侶的功能以外，還報道了其也與由脂質產生的信號傳導或細胞器的應答相關，另外，在巨噬細胞中還與炎癥反應相關(非專利文獻2、6、9)。對于FABP5，啟示了其參與角化細胞中的牛皮癬(psoriasis)的病變形成(非專利文獻7)，另外，還報道了在胰臟中參與作為固有免疫應答關鍵分子的細胞因子(cytokine)(1L-12p70)的控制(非專利文獻8)。

將作為2型糖尿病模型的ob/ob小鼠的FABP4敲除后的小鼠中發現有胰島素感受性降低的抑制(非專利文獻1)。另外，如果對FABP4敲除小鼠提供高脂肪食物，則與野生型相比較可以抑制胰島素感受性的降低，但是對體重增加或脂肪肝沒有發現有影響(非專利文獻4、10)。由于在FABP4敲除小鼠的脂肪細胞中FABP5的表達上升，因此，認為FABP5補償性地起作用(非專利文獻16、17)。在FABP5敲除小鼠中也發現與FABP4敲除小鼠同樣的傾向(非專利文獻12)。承接單基因敲除小鼠的結果，報道了進行FABP4/5雙基因敲除下的分析，并在提供高脂肪食物時與野生型相比較，抑制了食源性肥胖、胰島素抵抗性、2型糖尿病、脂肪肝的發生(非專利文獻13、14、15)。

如果將作為FABP抑制劑的BMS309403對2型糖尿病或動脈硬化的模型小鼠經口給藥，則發現有病情的改善(非專利文獻18)。對食源性肥胖的小鼠的給藥FABP4/5抑制劑引起了血中的甘油三酯值、游離脂肪酸值的降低等脂質異常癥的改善(非專利文獻19)。

然而，腸中主要表達的FABP是FABP2，因此，一直以來認為腸中的脂質代謝的作用是由FABP2實現的。

專利文獻1：日本特開2011-080804號公報

專利文獻2：日本特開2011-080803號公報

非專利文獻1：Hum.Genomics,2011,5:170-191

非專利文獻2：Nat.Rev.Drug Discov.,2008,7:489-503

非專利文獻3：Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A,1986,83:3786-3790

非專利文獻4：Nat.Med.,2001,7:699-705

非專利文獻5：Biochim.Biophys.Acta.,1999,1441:106-116.