[發明專利]制備用于局部施用的脂質體復合物的新方法及使用該脂質體復合物的抗腫瘤劑

有效

• 申請號: 201580001313.1
• 申請日: 2015-10-28
• 公開（公告）號: CN106232124B
• 公開（公告）日: 2018-01-12
• 發明（設計）人: 石田竜弘;江島清;福島正和
• 申請（專利權）人: 德爾塔菲制藥股份有限公司
• 主分類號: A61K31/7088
• 分類號: A61K31/7088;A61K9/127;A61K47/18;A61K47/24;A61P35/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司11262
• 代理人: 鄭霞

技術領域

本發明涉及一種制備用于局部施用的脂質體復合物的新方法及使用該脂質體復合物的抗腫瘤劑。

背景技術

脂質體由構成生物體的細胞膜的磷脂組成，生物相容性高，且能夠在生物體內保護藥物或活性成分免受分解酶等的同時進行運送，作為藥物遞送系統的有用工具而備受關注。

另一方面，引起RNA干擾(以下，描述為“RNAi”)的RNAi分子作為用于治療腫瘤等的有用的工具備受關注，開發了能夠抑制腫瘤的增殖的各種RNAi分子。另外，開發了使用由RNAi分子和脂質混合物構成的復合物(脂質體復合物)、將作為活性成分的RNAi分子遞送到腫瘤細胞的方法(非專利文獻1-3)。

本發明人等迄今為止開發了將涉及腫瘤的增殖的胸苷酸合成酶(以下，描述為“TS”)作為靶的RNAi分子(專利文獻1)，報道了：使用將該RNAi分子負載于由規定的比例構成的陽離子性脂質混合物的復合體(脂質體復合物)，例如通過靜脈內施用并遞送至腫瘤，由此可以抑制表達TS的腫瘤的增殖，進一步通過將該脂質體復合物與化療劑并用，可以提高對腫瘤的靶向作用，顯著地提高RNAi分子引起的抗腫瘤效果(專利文獻2)。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：WO2010/113844

專利文獻2：WO2012/161196

非專利文獻

非專利文獻1：Qixin Leng et al.，Drug Future.2009 September；34(9)：721.

非專利文獻2：Sherry Y.Wu et al.，The AAPS Journal，Vol.11,No.4，December 2009.

非專利文獻3：B.Ozpolat et al.，Journal of Internal Medicine 267；44-53 2009.

發明內容

發明所要解決的課題

在現有的脂質體復合物的制備中，制備脂質混合物的方法包括將作為構成成分的磷脂等預先溶解于氯仿或環己烷等有機溶劑的工序。但是，在利用氯仿或環己烷等有機溶劑的工業制備方法中，需要危險物操作設備或防爆裝置等大規模設備。另外，目前在脂質體復合物的制備時，在醫院的藥劑部門中，在對癌癥患者的給藥前制備RNAi分子的水溶液，另外，在制備脂質混合物之后，需要將兩者進行混合的繁雜的工序，需要大量勞動力。

因此，本發明的目的在于，提供一種脂質體復合物的工業制備方法，其不需要使用大量的氯仿或環己烷等有機溶劑、進一步進行冷凍干燥之后、將生成的脂質混合物分散于水等溶劑中、與RNAi分子的水溶液等混合的繁雜的脂質體復合物制備工序，直接制備通過僅懸浮于水等溶劑而容易地生成脂質體復合物的粉末。

另外，目的在于取消醫院的藥劑部門中的繁雜且需要大量勞動力的脂質體復合物的配制工序。

用于解決課題的技術方案

本發明人等為了解決上述課題重復進行了深入研究，結果發現：將二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、磷脂酰膽堿及陽離子性脂質溶解于生物相容性高、沒有爆炸性的醇，一邊攪拌該醇溶液一邊滴加于RNAi分子的溶液中之后，將該溶液進行冷凍干燥并除去醇等溶劑，由此可以制備脂質體復合物的冷凍干燥產物。而且，將通過該方法得到的脂質體復合物的冷凍干燥產物在適當的緩沖液中混合，進行對患有癌癥的靶器官的局部施用，由此可以有效地治療該癌癥患者。本發明基于上述見解。

本發明如下所述。

[1]一種制備脂質體復合物的方法，所述脂質體復合物含有二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、磷脂酰膽堿及陽離子性脂質以及RNAi分子，所述方法包括：

(a)將二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、磷脂酰膽堿及陽離子性脂質溶解于醇中的工序；

(b)在溶解有RNAi分子的溶液中在攪拌下滴加(a)中得到的醇溶液的工序；及

(c)將(b)中得到的溶液進行冷凍干燥的工序，

所述磷脂酰膽堿具有選自以下的(i)-(iii)中的一個以上的特征：

(i)包含至少一個含有碳-碳雙鍵的不飽和脂肪鏈；

(ii)包含至少一個含有順式的碳-碳雙鍵的不飽和脂肪鏈；

(iii)相變溫度低于0℃。

[2]根據[1]的方法，其中，陽離子性脂質為O,O’-雙十四碳酰基-Ν-(α三甲基銨基乙酰基)二乙醇胺氯化物(DC-6-14)。