[發明專利]AML1基因和ETO基因檢測探針及其制備方法和試劑盒在審
| 申請號： | 201511029404.4 | 申請日： | 2015-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN105483253A | 公開（公告）日： | 2016-04-13 |
| 發明（設計）人： | 陳紹宇;何瑰;張會清 | 申請（專利權）人： | 廣州安必平醫藥科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人： | 萬志香 |
| 地址： | 510665 廣東省廣州市*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | aml1 基因 eto 檢測 探針 及其 制備 方法 試劑盒 | ||
1.一種AML1基因和ETO基因檢測探針的制備方法，其特征在于，包括以 下步驟：
(1)選取針對AML1基因的BAC克隆為CTD-3245J1、RP11-77G18、 CTD-2349F18、CTD-3171K21和RP11-384N13中至少一種，和選取針對ETO 基因的BAC克隆為RP11-1107H4、RP11-302P1、CTD-2547C5、RP11-55J5和 CTD-2079N17中至少一種；
(2)對克隆分別提取質粒，得到質粒DNA，定量；
(3)用熒光素標記質粒DNA，針對同一種基因的質粒DNA所標記的熒光素相 同，針對AML1基因和針對ETO基因的檢測探針標記的熒光素的顏色不相同， 即得。
2.根據權利要求1所述的AML1基因和ETO基因檢測探針的制備方法，其特 征在于，針對ETO基因的所述BAC克隆為RP11-1107H4、RP11-302P1、 CTD-2547C5、RP11-55J5和CTD-2079N17。
3.根據權利要求1所述的AML1基因和ETO基因檢測探針的制備方法，其 特征在于，針對AML1基因的BAC克隆為CTD-3245J1、RP11-77G18、 CTD-2349F18、CTD-3171K21和RP11-384N13。
4.根據權利要求1所述的AML1基因和ETO基因檢測探針的制備方法，其特 征在于，所述熒光素為AlexaFITC、AlexaRhodamine、 TexasRed、pacific或DEAC。
5.根據權利要求1-4任一項所述AML1基因和ETO基因檢測探針的制備方法， 其特征在于，步驟(3)采用隨機引物法或切口平移法對質粒DNA進行熒光 素標記，所述標記的溫度為15℃-18℃，標記的時間為8-12小時。
6.根據權利要求1-5任一項所述的制備方法得到的AML1基因和ETO基因檢 測探針。
7.一種檢測急性非淋巴細胞白血病AML1和ETO融合基因的試劑盒，其特征 在于，包括有權利要求6所述的AML1基因和ETO基因檢測探針。
8.根據權利要求7所述的急性非淋巴細胞白血病AML1和ETO融合基因的試 劑盒，其特征在于，還包括有用于封閉重復序列的COTHumanDNA，和DAPI 復染劑。
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