[發明專利]基于納米銀顆粒與碳化硅砂紙SERS基底的恩氟沙星檢測方法

有效

• 申請號: 201511026302.7
• 申請日: 2015-12-31
• 公開（公告）號: CN105606587B
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 周駿;封昭;周露;陳棟
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 周玨

本發明公開了一種基于納米銀顆粒與碳化硅砂紙SERS基底的恩氟沙星檢測方法，其包括以下步驟：取銀納米粒子溶液并進行離心清洗，去除上清液，再使得到的沉積物懸浮于乙醇溶液中得到懸浮溶液；加入恩氟沙星標準樣品溶液形成恩氟沙星與銀納米粒子的混合溶液；再將混合溶液滴加到SERS基底上，得到標準檢測基片；之后測量標準檢測基片的SERS光譜；檢測時，提取檢測物并溶解形成待檢測樣品溶液，將待檢測樣品溶液與懸浮溶液混合，接著將該混合溶液滴加到SERS基底上，得到待檢測基片，測量待檢測基片的SERS光譜；如果兩個SERS光譜相同，則表明待檢測基片中含有恩氟沙星；優點是實現了基于納米銀顆粒與碳化硅砂紙SERS基底對恩氟沙星的檢測應用，且具有很高的檢測靈敏度。

技術領域

本發明涉及一種恩氟沙星(Enrofloxacin，C₁₉H₂₂FN₃O₃)的檢測技術，尤其是涉及一種基于納米銀顆粒與碳化硅(SiC)砂紙SERS(Surface-enhanced Raman scattering，表面增強拉曼散射)基底的恩氟沙星檢測方法。

背景技術

由于表面增強拉曼散射(SERS)光譜技術具有高靈敏度、無損和指紋譜特征等優點而被廣泛應用于分析化學、環境科學和生物醫學等眾多領域。對于SERS光譜技術而言，制備的貴金屬(如金、銀和銅等)納米粒子與貴金屬SERS基底的表面形貌對于SERS信號的增強具有嚴重影響。一般地，貴金屬納米粒子與貴金屬SERS基底的表面越粗糙，SERS信號的增強越大。因此，人們制備了各種形貌的貴金屬納米粒子和貴金屬SERS基底，以期獲得樣品的高靈敏度SERS光譜檢測。貴金屬納米粒子的制備主要有物理方法和化學方法。物理方法制備得到的貴金屬納米粒子的尺寸均勻、大小可控，但是步驟多、耗時長、成本高，而化學方法可以低成本批量制備多種形貌的貴金屬納米粒子。貴金屬SERS基底的制備方法主要有以下三種：第一種是直接將化學合成制備的貴金屬納米粒子溶膠涂覆在承載模板上作為SERS基底；第二種是在刻有陣列圖案的承載模板上利用物理、化學或電化學等方法沉積金屬納米粒子，得到金屬納米粒子陣列SERS基底；第三種是利用雙親分子，通過靜電或化學方法將金屬納米粒子自組裝固定在承載模板(如硅片或玻璃等)上形成SERS基底。比較而言，第一種方法相對簡單，可批量生產，但制備的SERS基底產生的SERS信號較弱；第二種方法制備的SERS基底可得到強的SERS信號，并且具有良好的穩定性和重復性，但制作工藝復雜，成本較高；第三種方法得到的SERS基底具有較高的SERS信號，但穩定性和重復性較差不足。

另一方面，恩氟沙星是一種合成氟喹諾酮類抗生素，由于其具有廣譜抗菌活性和很強的滲透性，可以有效的殺滅動物體內的多種細菌。雖然恩氟沙星是一種有效的抗菌劑，但是過量使用恩氟沙星也會導致環境污染、提升水生環境中抗生素耐藥性細菌的增殖，以及改變人體腸道內的微生物群等副作用，給人們的健康帶來巨大威脅。因此，對食品與環境中的恩氟沙星的含量進行檢測，是十分必要的。目前，對恩氟沙星的檢測方法主要有液相色譜-串聯質譜法、時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)技術、化學發光酶聯免疫檢測。這幾種方法具有高的檢測靈敏度，但檢測費用高、時間消耗長，以及對檢測者專業素質的要求高，因而影響到它們的普遍應用。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種基于納米銀顆粒與碳化硅砂紙SERS基底的恩氟沙星檢測方法，其通過SERS信號的增強實現了對恩氟沙星的高靈敏度檢測。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種基于納米銀顆粒與碳化硅砂紙SERS基底的恩氟沙星檢測方法，其特征在于結合銀納米粒子與碳化硅砂紙SERS基底對恩氟沙星進行檢測，具體步驟如下：

步驟一：取銀納米粒子溶液注入離心管，然后對銀納米粒子溶液進行離心清洗，接著在離心清洗結束后去除上清液，保留沉淀在離心管底部的銀納米粒子，再將銀納米粒子沉積物懸浮于質量百分濃度為50％的乙醇溶液中，得到單分散的均勻銀納米粒子的懸浮溶液；