[發明專利]大型溞測定新煙堿類農藥毒性的方法

在審

• 申請號: 201511008386.1
• 申請日: 2015-12-29
• 公開（公告）號: CN105651984A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 陳昂;劉勇;張德詠;羅香文;嚴清平;劉建宇;羅源華
• 申請（專利權）人: 湖南省植物保護研究所
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所 43008
• 代理人: 趙洪;黃藝平

1.一種大型溞測定新煙堿類農藥毒性的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將新煙堿類農藥溶解制成農藥儲備液；

(2)將所述農藥儲備液與ElendtM₄培養液混合配制成梯度濃度的混合液，將所述混合 液做為大型溞的生活用水，持續培養48h，培養過程中，每隔24h時記錄大型溞的生物效應 參數和所述混合液的理化參數；

(3)根據大型溞的生物效應參數和農藥儲備液的理化參數計算農藥對半數抑制濃度 EC₅₀，判斷新煙堿類農藥的毒性。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中所述大型溞為來源于同 一母系的孤雌繁殖3代以上，出生時間小于24h的非頭胎健康幼溞。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步驟(2)進行的過程中，所述大 型溞不喂食；所述大型溞不離開水，轉移時用滴管轉移。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中所述ElendtM₄培養液 為空氣曝氣泵曝氣處理24h以上的ElendtM₄培養液。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述ElendtM₄培養液的pH為6.0～9.0， 硬度為140～250mg/L，溶解氧≥3mg/L。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述生 物效應參數為大型溞的抑制率；所述理化參數為混合液的水溫、pH值、溶解氧含量；判斷所 述大型溞抑制的標準為輕晃燒杯，溞在15s內不游動視為活動抑制，但允許附肢微弱擺動。

7.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述培 養過程控制水溫為18℃～22℃、每日光照16h、溶解氧濃度不低于3.0mg/L。

8.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述新煙堿類農藥的毒性的 判斷標準為：EC₅₀＞10.0mga.i./L表示低毒，1.00mga.i./L＜EC₅₀≤10.0mga.i./L表示中毒， 0.100mga.i./L＜EC₅₀≤1.00mga.i./L表示高毒，EC₅₀≤0.100mga.i./L表示劇毒。

9.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)具體為：將 新煙堿類農藥溶解于ElendtM₄培養液中，制成農藥儲備液；所述大型溞測定新煙堿類農藥毒 性的方法還設有空白對照組；所述空白對照組以ElendtM₄培養液為大型溞的生活用水。

10.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)具體為：將 新煙堿類農藥溶解于ElendtM₄培養液和有機溶劑的混合液中，制成農藥儲備液；所述大型溞 測定新煙堿類農藥毒性的方法還設有空白對照組和溶劑對照組；所述空白對照組以ElendtM₄培養液為大型溞的生活用水，所述溶劑對照組為丙酮和吐溫-80的混合溶液。