[發(fā)明專利]一種硫醇類藥物含量的檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201511006119.0
• 申請日: 2015-12-29
• 公開（公告）號: CN105628813A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙赫;杜朋輝;曹宏斌;張笛;劉晨明
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院過程工程研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟;侯瀟瀟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種硫醇類藥物的定量檢測方法，尤其涉 及一種使用衍生化預(yù)處理和液相色譜-紫外檢測器分離檢測硫醇類藥物的方法。

背景技術(shù)

硫醇類藥物是一類具有巰基結(jié)構(gòu)藥物的總稱，主要包括美司鈉(mesna)，卡 托普利(captopril)，半胱氨酸(cysteamine)和硫普羅寧(tiopronin)等化合物，目前在 醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于心力衰竭，X射線損傷，肝炎和血性膀胱炎等疾病的治療。 這些藥物多有一定的副作用，可能引起咳嗽，頭痛，瘙癢，胸悶等癥狀。

硫醇類藥物常見的分析定量方法有液相色譜，離子色譜分離，紫外、電化 學(xué)、蒸發(fā)光散射以及近紅外光譜法，還有滴定法、旋光檢測法等。如CN 102520093A提出一種離子色譜串聯(lián)紫外檢測法測定卡普托利含量的方法，該方 法采用離子色譜陽離子交換系統(tǒng)與紫外檢測器聯(lián)用，根據(jù)物質(zhì)在色譜柱上保留 行為的差異，選擇合適的分離條件，再選擇最優(yōu)的紫外檢測波長，能夠在比較 高的靈敏度下分離檢測卡托普利，該方法雖然簡單，但硫醇類藥物極性較強(qiáng)， 在色譜柱分離過程通常出峰時(shí)間過早，得不到有效分離；另外，硫醇類藥物的 化學(xué)結(jié)構(gòu)一般缺少匹配的紫外或熒光信號響應(yīng)，導(dǎo)致該方法靈敏度低，重現(xiàn)性 差。

已有文獻(xiàn)使用衍生化預(yù)處理的方法檢測硫醇類藥物，如文獻(xiàn)已報(bào)道使用3- 溴甲基-異丙安替比林(BMP)作為衍生化試劑屏蔽卡普托利結(jié)構(gòu)中的巰基基團(tuán)， 能夠在比較高的靈敏度下分離檢測卡普托利(3-Bromomethyl-propyphenazoneas anewderivatizationreagentforhighperformanceliquidchromatographyofcaptopril andhydrochlorothiazidewithUV-detection,Biomed.Chromatogr.,1998,12:57)，但 該方法衍生化過程需要加入碳酸鉀作為催化劑，操作步驟相對復(fù)雜，成本較高； CN102977113A公開了一種基于一種香豆素色烯衍生物檢測硫醇的方法，所述 的香豆素色系衍生物為8,9-dihydro-2H-cyclopenta[b] pyrano[2,3-f]chromene-2,10(7AH)-dione(簡稱：CPC)，檢測方法是基于CPC， 在pH為7.4的HEPES溶液中定量地檢測硫醇的含量；CN103575727A公開了 一種檢測硫醇的試劑，所述試劑是馬來酰亞胺衍生物:2-(2,5-二氧代-2,5-二氫 -1H-吡咯-1-基)-1H-苯并〔de〕異喹啉-1,3(2H)-二酮；CN102183471A公開 了一種硫醇的定量檢測方法和試劑盒，所述方法和試劑盒基于一種色烯衍生物 NPC：7-nitro-2，3-dihydro-1H-cyclopenta[b]chromen-1-one，在pH為7.0的緩 沖溶液中定量地檢測硫醇的含量。但是，這些方法不能避免硫醇類藥物的聚合， 并且檢測靈敏度不高。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種硫醇類藥物含量的 檢測方法，所述方法簡單易行，操作簡便，且具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性，可 廣泛應(yīng)用于生物制藥、藥物動(dòng)力學(xué)及藥品安全等領(lǐng)域。

為達(dá)此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種硫醇類藥物含量的檢測方法，所述方法包括如下步驟：

(1)向硫醇類藥物的溶液中加入還原試劑，還原溶液中的二硫聚體組分， 得到還原產(chǎn)物溶液；

(2)將還原產(chǎn)物溶液與醌類衍生化試劑進(jìn)行衍生化反應(yīng)，得到衍生化產(chǎn)物 溶液；

(3)檢測衍生化產(chǎn)物的含量，得到硫醇類藥物的含量。

所述還原產(chǎn)物為硫醇藥物的單體結(jié)構(gòu)形式，所述衍生化產(chǎn)物為醌類衍生化 試劑與硫醇類藥物的硫醇基團(tuán)反應(yīng)生成的以C-S鍵合的產(chǎn)物。

本發(fā)明提供的硫醇類藥物含量的檢測方法，其檢測原理為：先使用還原試 劑對待檢測的硫醇類藥物的溶液進(jìn)行還原性處理，之后，使用醌類衍生化試劑 對硫醇類藥物進(jìn)行預(yù)衍生化，由于醌類衍生化試劑的結(jié)構(gòu)式中存在大量吸電子 位點(diǎn)，可與富電子的硫醇基團(tuán)通過親核加成反應(yīng)生成以C-S鍵合的衍生化產(chǎn)物， 并且所述加成反應(yīng)迅速且無其他副反應(yīng)，由于硫醇基團(tuán)被醌類化合物屏蔽，氧 化副反應(yīng)得到抑制，所述C-S鍵合的衍生化產(chǎn)物易檢測分離。