[發明專利]一種普洱生茶的等級及質量評價方法

在審

• 申請號: 201511001401.X
• 申請日: 2015-12-29
• 公開（公告）號: CN105510475A
• 公開（公告）日: 2016-04-20
• 發明（設計）人: 王麗娜;韋建榮;納力;馬銀海;袁琳;堵源康;卓婧;武姍姍;周雪芳;李茜
• 申請（專利權）人: 云南白藥天頤茶品有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 昆明合眾智信知識產權事務所 53113
• 代理人: 朱玉丹

技術領域

本發明涉及一種茶葉的等級及質量評價方法，具體的是采用中藥指紋圖譜分析方 法對普洱生茶的等級及質量評價方法。本發明的等級及質量分析評價方法可以用于普洱茶 生茶及其加工產品的等級及質量分析。

背景技術

普洱茶是以云南省一定區域內的云南大葉種曬青毛茶為原料，經過后發酵加工而 成的散茶和緊壓茶，外形色澤褐紅，內質湯色紅濃明亮，香氣獨特陳香，滋味醇厚回甘，葉底 褐紅。有生茶和熟茶之分，生茶自然發酵，熟茶人工催熟。

茶葉在中國有很多年的飲用歷史，隨著人們對食品安全日益重視，各類食品包括茶葉 的質量標準也越來越高，目前普洱茶所執行的標準是國家地理標志產品的國家標準，從產 地、鮮葉、工藝、理化指標等多個項目對普洱茶進行了規定，但其中的分級指標僅通過感官 對比進行，缺乏客觀評價指標，同時標準中規定了茶多酚的檢測，茶葉中其他指標性成分如 茶氨酸、咖啡因成分現有國家標準的檢測方法，但目前沒有產品標準對其限量等進行規定， 對茶葉等級和質量的評價都是建立在比較主觀的滋味、香氣等指標上。本發明中涉及的中 藥指紋圖譜研究是中藥質量研究的熱點領域，其主要通過廣泛的樣品收集后制定特征指紋 圖譜，再通過規定各個峰的相對保留時間進行中藥質量的控制。雖然中藥指紋圖譜的研究 已經較為普遍，但將其移植到茶葉的研究和質量控制上比較鮮見。現有文獻研究主要針對 綠茶中的咖啡因、茶多酚單個成分的研究，或者更加確切的說是針對其中的成分研究，比如 成分的含量對比等，尚未見到有關普洱茶整體成分構成情況的等級及質量分析評價研究。 普洱茶產品的等級及質量評價定級等工作主要由有經驗的審評員完成，尤其是其中的內質 感官指標項目，完全需要審評員憑借經驗進行判斷，這種主觀性很強的評價方法很容易受 到審評人員的飲食、情緒等主觀因素影響。目前其他茶類的等級評價同樣存在這一問題，普 遍以主觀檢驗為主，客觀檢驗項目的專屬性又不強，所以相對全面的茶類產品客觀評價體 系亟待建立。

發明內容

本發明的目的是針對目前評價普洱茶標準主觀性強的技術缺陷，提供一種以高效 液相色譜法為基礎的一種普洱生茶的等級及質量評價方法的技術方案。該方法充分結合現 有天然產物研究技術方法，結合現行普洱茶產品的標準要求，考慮能夠相對客觀評價普洱 茶等級及質量的方法。

本發明的技術方案；一種普洱茶的等級及質量評價方法，通過高效液相色譜法獲 得普洱茶樣品的紫外吸收色譜，利用歸一化法計算色譜中特征峰的百分比例，按照其中一 個或多個特征峰的比例進行等級評價，其步驟如下：

a．樣品的前處理方法：取表沒食子兒茶素沒食子酸酯以甲醇做溶劑，配制成每1ml含 0.5mg的溶液，即得參照成分/對照品溶液；取普洱茶生茶供試樣過40目篩的粉末3-5g，加入 12-20倍量的溶劑于70-80℃水浴浸提10-15分鐘，浸提2次，離心，合并上清液于80℃水浴上 蒸干，殘渣用甲醇定容至10ml即得普洱茶生茶供試品待測液；

b．高效液相的色譜條件：固定相為十八烷基鍵合硅膠，流動相由有機相、水相、調節劑 相組成，檢測波長245nm-360nm；流動相洗脫條件為水相與有機相梯度洗脫，水相在0-15min 由體積比85%-90%降至80%-84%、在15-35min由體積比80%-84%降至65%-70%；

c．采用步驟b所述的高效液相的色譜條件，以參照成分/對照品為檢測對象，按照色譜 條件進行分析，得到表沒食子兒茶素沒食子酸酯的色譜圖；

d．采用步驟b所述的高效液相的色譜條件，以普洱茶生茶供試品待測液為檢測對象，按 照色譜條件進行分析，得到普洱茶生茶樣品的色譜圖，在色譜圖上找到與表沒食子兒茶素 沒食子酸酯保留時間一致的峰，指認出參照成分在普洱茶生茶樣品中的位置；

e.采集5-30分鐘之內的色譜峰，以表沒食子兒茶素沒食子酸酯作為參照成分，分別按 普洱茶生茶特征指紋圖譜中的特征峰標記方法標記供試樣中的特征峰至少有8個，計算其 中各個特征峰面積在所有峰面積中的百分含量之和應大于等于65%。

所述步驟b中流動相中的有機相為甲醇、乙腈、丙酮中的至少1種，調節劑相為甲 酸、乙酸、三氟乙酸、磷酸中的至少1種。

所述步驟b中流動相的有機相為甲醇、乙腈的一種或二種、調節劑為乙酸、三氟乙 酸中的一種或二種。