[發明專利]檢測原料膠中大腸菌群含量的方法

有效

• 申請號: 201511001131.2
• 申請日: 2015-12-28
• 公開（公告）號: CN105420342B
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 吳玉秋;薛志清;梁春梅;喻東威;宋曉東
• 申請（專利權）人: 內蒙古蒙牛乳業（集團）股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/24
• 分類號: C12Q1/24;C12Q1/10;C12Q1/06;C12R1/19
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

本發明提出檢測原料膠中大腸菌群含量的方法。方法包括：(1)將原料膠置于含有生理鹽水的無菌均質袋中，進行第一均質處理，得到第一均質處理產物；(2)將第一均質處理產物置于無菌均質袋中，再向無菌均質袋中加入結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養基，并進行第二均質處理，得到第二均質處理產物；(3)將含有第二均質處理產物的均質袋進行平整化處理；(4)將經過平整化處理的含有第二均質處理產物的均質袋進行靜置培養，得到可疑大腸菌群菌落；以及(5)將可疑大腸菌群菌落接種于含有煌綠乳糖膽鹽肉湯培養基的試管中進行培養，以便確定大腸菌群菌落數，進而確定對原料膠中大腸菌群含量。本發明的方法能夠有效提高檢出率，準確性強。

技術領域

本發明涉及食品領域。具體地，本發明涉及檢測原料膠中大腸菌群含量的方法。

背景技術

原料膠主要是指能夠作為乳化劑用于食品生產的一類膠體物質。由于其本身可攜帶大腸桿菌，為防止其攜帶的大腸桿菌進入食品中，引起不良后果，需要對原料膠中大腸桿菌含量進行測定，滿足要求的才可應用于食品生產中。

然而，目前測定原料膠中大腸桿菌含量的方法仍有待改進。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明的一個目的在于提出檢測原料膠中大腸菌群含量的方法。該方法能夠有效提高原料膠中大腸菌群含量的檢出率，檢測結果的準確性強。

在本發明的第一方面，本發明提出檢測原料膠中大腸菌群含量的方法。根據本發明的實施例，所述方法包括：(1)將所述原料膠置于裝有生理鹽水的無菌均質袋中，進行第一均質處理，得到第一均質處理產物；(2)將所述第一均質處理產物置于無菌均質袋中，再向無菌均質袋中加入結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養基，并進行第二均質處理，得到第二均質處理產物；(3)將裝有所述第二均質處理產物的均質袋進行平整化處理；(4)將經過所述平整化處理的裝有所述第二均質處理產物的均質袋進行靜置培養，得到可疑大腸菌群菌落；以及(5)將所述可疑大腸菌群菌落接種于裝有煌綠乳糖膽鹽肉湯培養基的試管中進行培養，以便確定大腸菌群菌落數，進而確定對所述原料膠中大腸菌群含量。根據本發明的優選實施例，基于1克所述原料膠，所述生理鹽水的體積為9毫升。

發明人意外地發現，通過根據本發明實施例的方法，能夠準確地檢測原料膠中的大腸桿菌含量，有效地避免了現有技術例如目前GB4789.3-2010《食品安全國家標準-食品微生物學檢驗-大腸菌群的測定》應用于原料膠檢測時的缺陷。具體地，利用國標方法，將稀釋的樣液加入至平皿，再向平皿中傾注培養基，混勻后進行培養。但是，由于原料膠經10倍稀釋后，與培養基混合后容易聚集成團，導致成塊的原料膠中的大腸桿菌無法接觸培養基，進而無法生長，影響檢測的準確性及可信度。

需要說明的是，本發明的技術方案是發明人通過大量的篩選試驗而獲得的，發明人曾經嘗試過其他的檢測方案，并未獲得有效的檢測結果。例如，發明人采用過下列檢測步驟：(1)將原料膠用生理鹽水梯度稀釋100倍，得到稀釋液；(2)取稀釋液與培養基在均質袋中混合，并靜置培養，通過計數菌落數以確定原料膠中大腸桿菌含量。將原料膠稀釋100倍得到的稀釋液與培養基混合靜置時，由于原料膠中大腸桿菌含量較少，容易導致每次吸取的稀釋液中菌數不同，造成誤差。另外，還將使檢測限升高。

根據本發明的實施例，上述檢測原料膠中大腸菌群含量的方法還可以具有下列附加技術特征：

根據本發明的實施例，所述第一均質處理是在轉速為8000～10000r/min的條件下進行1～2min；所述第二均質處理是在轉速為8000～10000r/min的條件下進行1min，基于1克所述第一均質處理產物，所述培養基的體積為2～4毫升。由此，能夠有效提高原料膠中大腸菌群含量的檢出率，檢測結果的準確性強。

根據本發明的實施例，所述平整化處理所得到的培養基的厚度為0.1～0.5毫米，優選為0.3～0.4毫米。由此，能夠有效提高原料膠中大腸菌群含量的檢出率，檢測結果的準確性強。